Комплексное руководство по общей и частной микробиологии, иммунологии и вирусологии: Детальный анализ для академической контрольной работы

Микробиология, иммунология и вирусология — это не просто отдельные дисциплины, а взаимосвязанные ветви единого древа биологических наук, чьи корни глубоко проникают в практику медицины и биотехнологий. В условиях современной глобализации и постоянного появления новых угроз здоровью, таких как пандемии вирусных инфекций или рост антибиотикорезистентности бактерий, понимание фундаментальных принципов, лежащих в основе этих наук становится критически важным. Отличия между мельчайшими формами жизни, механизмы их взаимодействия с окружающей средой и макроорганизмом, а также способы борьбы с ними формируют базис для диагностики, лечения и профилактики заболеваний. Настоящее руководство представляет собой исчерпывающий источник знаний, структурированный для выполнения академической контрольной работы, охватывающий ключевые вопросы общей и частной микробиологии, иммунологии и вирусологии. Мы детально рассмотрим клеточную организацию, особенности культивирования микроорганизмов, эпидемиологию и патогенез инфекций, механизмы иммунной защиты и, наконец, принципы обеззараживания, превращая каждый тезис в глубокий аналитический экскурс.

Сравнительный анализ клеточной организации: прокариоты и эукариоты

На клеточном уровне мир живого делится на два фундаментально различных царства — прокариоты и эукариоты. Это разделение, возникшее миллиарды лет назад, определяет все последующее многообразие форм жизни, от простейших бактерий до сложнейших многоклеточных организмов. Понимание этих различий является краеугольным камнем в микробиологии, поскольку оно объясняет уникальные биологические процессы, стратегии выживания и уязвимости каждого типа клеток.

Морфологические и структурные особенности

Первое, что бросается в глаза при сравнении прокариот и эукариот, это их размеры. Клетки прокариот, например, бактерии, как правило, не превышают 10 мкм, что делает их микроскопическими и невидимыми невооруженным глазом. В противоположность им, эукариотические клетки значительно крупнее, их размеры варьируются от 10 до 100 мкм. Эта разница в размерах не случайна и отражает кардинальные различия в их внутренней организации.

Главное архитектурное отличие заключается в наличии или отсутствии оформленного ядра. У прокариот, таких как бактерии и археи, отсутствует ядро, окруженное мембранной оболочкой. Их генетический материал, называемый нуклеоидом, свободно располагается в цитоплазме. Этот «голый» генетический аппарат обеспечивает более быстрые процессы репликации и транскрипции, что является одним из преимуществ прокариот в быстро меняющихся условиях.

Эукариотические же клетки, к которым относятся животные, растения, грибы и простейшие, обладают сложной внутренней структурой. Их генетический материал тщательно упакован внутри ядра, защищенного двухмембранной оболочкой, и содержит ядрышки, ответственные за синтез рибосом. Но на этом различия не заканчиваются. Прокариоты лишены мембранных органоидов, таких как митохондрии (энергетические станции клетки), эндоплазматический ретикулум (сеть для синтеза белков и липидов), аппарат Гольджи (модификация и упаковка молекул), лизосомы (клеточные «мусорщики») и пероксисомы (утилизация токсичных веществ). Все эти сложные структуры, присущие эукариотам, позволяют им выполнять специализированные функции, требующие компартментализации.

Однако, не стоит думать, что прокариоты совсем без внутренних структур. У них присутствуют мезосомы — впячивания цитоплазматической мембраны, которые, хотя и не являются полноценными органоидами, выполняют ряд функций, схожих с пищеварительной и выделительной, частично заменяя лизосомы и играя роль в клеточном дыхании и репликации ДНК. Эти адаптации позволяют прокариотам эффективно функционировать без сложной внутренней архитектуры.

Генетический аппарат и деление клеток

Генетический материал является основой жизни, и его организация также кардинально отличается. У прокариот генетический материал представлен одной кольцевой молекулой ДНК, которую часто называют «бактериальной хромосомой» или нуклеоидом. Эта кольцевая ДНК компактно уложена в цитоплазме. Кроме того, многие прокариоты содержат небольшие кольцевые молекулы ДНК, называемые плазмидами, которые несут дополнительные гены, часто отвечающие за устойчивость к антибиотикам или факторы вирулентности.

В отличие от этого, у эукариот генетический материал организован в виде множества линейных молекул ДНК, которые тесно связаны с белками (гистонами) и формируют хромосомы. Эти хромосомы расположены внутри ядра и подвергаются сложным процессам конденсации и деконденсации во время клеточного цикла.

Рибосомы, белково-РНК комплексы, ответственные за синтез белка, присутствуют как у прокариот, так и у эукариот, но различаются по размеру и составу. Рибосомы прокариот меньше по размеру и относятся к типу 70S (имеют константу седиментации 70 Сведберг), состоящие из двух субъединиц: 50S и 30S. Эукариотические рибосомы крупнее, относятся к типу 80S и состоят из 60S и 40S субъединиц. Это различие имеет важное медицинское значение, так как многие антибиотики, такие как тетрациклины и аминогликозиды, избирательно ингибируют синтез белка на 70S рибосомах бактерий, не затрагивая 80S рибосомы человека.

Клеточный центр, играющий ключевую роль в организации микротрубочек и клеточном делении, отсутствует у прокариот. У эукариот он обычно присутствует и состоит из центриолей, которые формируют веретено деления во время митоза и мейоза.

Что касается деления клеток, прокариоты размножаются гораздо проще и быстрее, используя бинарное деление, или амитоз. Этот процесс включает репликацию ДНК и последующее разделение клетки на две дочерние, практически идентичные материнской. Эукариотические клетки делятся более сложными способами: митозом для роста и восстановления тканей, и мейозом для образования гамет и полового размножения, обеспечивая генетическое разнообразие.

Клеточная стенка и локомоция

Клеточная стенка, внешний защитный слой, также демонстрирует значительные различия. У большинства бактерий (прокариот) клеточная стенка состоит из пептидогликана (муреина) – уникального полимера, образованного повторяющимися дисахаридными единицами N-ацетилглюкозамина и N-ацетилмурамовой кислоты, связанных пептидными мостиками. Эта структура придает клеточной стенке прочность и поддерживает форму клетки, а также является мишенью для многих антибиотиков (например, пенициллинов).

У эукариот ситуация иная: у животных клеточная стенка полностью отсутствует. У растений она состоит из целлюлозы, а у грибов — из хитина. Эти полимеры обеспечивают механическую поддержку и защиту, но по химической природе существенно отличаются от пептидогликана.

Что касается движения, жгутики могут быть обнаружены как у прокариот, так и у некоторых эукариот, но их строение и механизм работы различны. Прокариотические жгутики представляют собой относительно простые нити, состоящие из белка флагеллина. Они вращаются подобно пропеллеру, обеспечивая движение бактерии. Эукариотические жгутики, напротив, имеют более сложное строение, известное как «9+2» – девять пар микротрубочек по периферии и две в центре. Они совершают волнообразные движения, обеспечивая перемещение клетки.

Наконец, стоит упомянуть о фотосинтезе. У прокариот, таких как цианобактерии или пурпурные бактерии, может осуществляться анаэробный фотосинтез с использованием бактериохлорофилла, который, в отличие от хлорофилла растений, не сопровождается выделением кислорода (O₂). Это отражает древние адаптации к условиям ранней Земли с бескислородной атмосферой.

Признак	Прокариоты (например, бактерии)	Эукариоты (животные, растения, грибы)
Размеры клеток	До 10 мкм	От 10 до 100 мкм
Оформленное ядро	Отсутствует, генетический материал (нуклеоид) в цитоплазме	Присутствует, окружено двухмембранной оболочкой, есть ядрышки
Генетический материал	Кольцевая ДНК («бактериальная хромосома»)	Линейные молекулы ДНК, организованные в хромосомы
Мембранные органоиды	Отсутствуют	Присутствуют (митохондрии, ЭПР, аппарат Гольджи, лизосомы, пероксисомы)
Мезосомы	Присутствуют, функции схожи с пищеварительной и выделительной	Отсутствуют
Рибосомы	Мелкие, тип 70S	Крупные, тип 80S
Клеточный центр	Отсутствует	Присутствует
Деление клеток	Амитоз (бинарное деление)	Митоз и мейоз
Клеточная стенка	Обычно из пектина и муреина (пептидогликан)	У животных отсутствует, у растений из целлюлозы, у грибов из хитина
Фотосинтез	Анаэробный (бактериохлорофилл), без выделения O2	Аэробный (хлорофилл), с выделением O2 (у растений)
Жгутики	Простые нити из флагеллина, вращаются	Сложное строение (9+2), волнообразные движения

Питательные среды для культивирования бактерий и оценка микробной контаминации воздуха в ЛПУ

Культивирование микроорганизмов — краеугольный камень микробиологии, позволяющий изучать их морфологию, физиологию, биохимические свойства, а также выделять и идентифицировать возбудителей инфекционных заболеваний. В основе успешного культивирования лежит правильный выбор и приготовление питательных сред, которые должны обеспечивать все условия для роста и размножения бактерий. Особенно актуально это в лечебно-профилактических учреждениях (ЛПУ), где контроль микробной контаминации воздуха является критически важным аспектом обеспечения санитарно-эпидемиологической безопасности.

Требования к питательным средам

Питательные среды — это искусственно созданные субстраты, имитирующие естественную среду обитания микроорганизмов. Чтобы быть эффективными, они должны соответствовать ряду строгих требований:

1. Усвояемость и метаболические потребности: Среды должны содержать питательные вещества в легко усваиваемой форме, удовлетворяющие специфическим потребностям обмена веществ микробной клетки. Это означает наличие источников углерода, азота, фосфора, серы и других элементов.
2. Полный набор веществ: Помимо основных органогенов (углерод, водород, кислород, азот), питательные среды обязаны включать минеральные вещества (натрий, калий, магний, кальций, железо), микроэлементы (цинк, медь, марганец, кобальт) и факторы роста, такие как витамины, аминокислоты, пурины и пиримидины, которые микроорганизмы не могут синтезировать самостоятельно.
3. Стерильность: Для предотвращения роста посторонних микроорганизмов и получения чистой культуры, питательные среды должны быть абсолютно стерильными. Стерилизация обычно проводится автоклавированием, фильтрацией или тиндализацией.
4. Оптимальная концентрация водородных ионов (pH): Большинство патогенных бактерий предпочитают слабощелочную среду, с оптимальным pH в диапазоне 7.2-7.4. Отклонение от этого диапазона может ингибировать рост или даже привести к гибели микроорганизмов.
5. Буферность: В процессе метаболизма микроорганизмы могут выделять кислые или щелочные продукты, изменяя pH среды. Для поддержания стабильного pH питательные среды должны обладать буферностью. Это достигается добавлением буферных систем, таких как фосфатные соли (например, фосфат калия) или пептоны, которые способны связывать избыток кислот или щелочей.
6. Изотоничность: Осмотическое давление среды должно быть изотоничным для микробной клетки, то есть примерно соответствовать 0.5% раствору хлорида натрия (NaCl). Значительные изменения осмотического давления могут вызвать плазмолиз (сжатие) или плазмоптиз (разрыв) клеток.
7. Влажность: Плотные среды должны иметь достаточную влажность (не менее 60% влаги), так как вода является основным растворителем и участником биохимических реакций.

Классификация питательных сред

Для удобства и эффективности в лабораторной практике питательные среды классифицируются по нескольким признакам:

По составу:

• Натуральные (естественные) среды: Состоят из продуктов животного или растительного происхождения (например, молоко, яйца, овощи, ткани, желчь, сыворотка крови). Их химический состав не всегда точно известен, что может влиять на воспроизводимость результатов, но они часто обеспечивают оптимальные условия для роста многих «капризных» микроорганизмов.
• Полусинтетические среды: Содержат как вещества неопределенного (например, пептон, дрожжевой экстракт), так и известного химического состава (например, глюкоза, соли).
• Синтетические среды: Состоят исключительно из химически чистых соединений в точно указанных концентрациях. Их состав полностью известен и воспроизводим, что делает их идеальными для изучения метаболических потребностей микроорганизмов.

По консистенции:

• Жидкие среды: Не содержат агара (или содержат его в минимальных количествах) и используются для изучения физиолого-биохимических особенностей микроорганизмов, накопления биомассы и проведения тестов на подвижность.
• Полужидкие среды: Содержат до 1% агара. Используются для длительного хранения культур, изучения подвижности и анаэробных бактерий.
• Плотные (агаровые) среды: Содержат 1.5-2.5% агара. Применяются для выделения чистых культур, изучения морфологии колоний, проведения диагностических тестов и количественного учета микроорганизмов.
• Сыпучие среды: Используются для длительного хранения культур микроорганизмов путем адсорбции их на поверхности частиц стерильного песка или силикагеля в высушенном состоянии, поддерживая жизнеспособность.
• Сухие среды: Представляют собой гигроскопические дегидратированные порошки, содержащие все необходимые компоненты. Они удобны для хранения и приготовления больших объемов сред путем добавления дистиллированной воды и стерилизации.

По назначению:

• Простые среды (общего назначения, базовые): Пригодны для выращивания большинства видов микроорганизмов и служат основой для приготовления более сложных, специальных сред (например, мясо-пептонный агар/бульон).
• Специальные (элективные, избирательные) среды: Разработаны для выделения или преимущественного развития одного вида или группы микроорганизмов. Среды обогащения (например, селенитовый бульон) способствуют росту целевых микроорганизмов, подавляя при этом сопутствующую микрофлору.
• Дифференциально-диагностические среды: Применяются для изучения биохимических свойств и дифференцировки микроорганизмов по их ферментативной активности (например, среды Гисса для определения способности сбраживать углеводы, среды Эндо, Левина, Плоскирева, Олькеницкого для идентификации энтеробактерий).
• Консервирующие (транспортные) среды: Используются для сохранения жизнеспособности микроорганизмов в период от взятия биоматериала до его посева в лаборатории, предотвращая их гибель или чрезмерное размножение.
• Среды накопления: Способствуют быстрому и обильному росту определенных видов микроорганизмов из смешанных популяций.

Оценка микробной контаминации воздуха в ЛПУ

Санитарно-микробиологическое исследование воздуха является неотъемлемой частью контроля качества воздушной среды, особенно в лечебно-профилактических учреждениях, где риск внутрибольничных инфекций (ВБИ) особенно высок. Чистый воздух — залог безопасности пациентов и медицинского персонала.

Процесс исследования включает:

1. Отбор проб воздуха: Выполняется с использованием специализированного оборудования.
2. Обработка, транспортировка и хранение проб: Должны осуществляться таким образом, чтобы минимизировать потерю жизнеспособности микроорганизмов и предотвратить контаминацию.
3. Бактериологический посев: Собранные микроорганизмы высеваются на питательные среды.
4. Культивирование: Чашки Петри или фильтры с собранными микроорганизмами инкубируются в термостате при температуре 37°C в течение 24-48 часов для роста бактерий и при 22°C в течение 5 суток для грибов.
5. Идентификация микроорганизмов: Выросшие колонии подсчитываются, а затем проводится их микроскопическое, биохимическое и серологическое исследование для идентификации.

Методы отбора проб воздуха:

• Седиментационный метод (метод оседания): Простой, но менее точный метод, основанный на естественном оседании микроорганизмов из воздуха на поверхность стерильной питательной среды в открытых чашках Петри. Чашки Петри диаметром 90-100 мм с питательной средой (например, мясопептонным агаром) экспонируются в течение 5-10 минут. Количество осевших микроорганизмов затем пересчитывается на 1 м³ воздуха с использованием коэффициента Омелянского, где одна колония на чашке Петри соответствует примерно 100 КОЕ (колониеобразующих единиц) в 1 м³ воздуха при экспозиции 5 минут. Метод непригоден для оценки загрязненности атмосферного воздуха из-за низкой чувствительности и невозможности учета ��бъема прососанного воздуха.
• Аспирационный метод: Считается более совершенным и количественно точным. Воздух принудительно просасывается через специальные приборы (например, ПУ-1Б или аналогичные, такие как приборы Кротова, А-818), осаждая микроорганизмы на питательной среде или фильтре. Приборы просасывают определенный объем воздуха (обычно 100-250 литров) со скоростью 20-25 литров в минуту через специальные улавливающие устройства (щелевые приборы, фильтры ААФА или Петри), на которых осаждаются микроорганизмы.
• Метод импакции: Использует принцип направленного потока воздуха на питательную среду. Приборы, такие как пробоотборники типа Andersen или «БиоТест-В», за счет высокой скорости воздушного потока направляют частицы воздуха с микроорганизмами на поверхность агаровой среды, где происходит их оседание и прилипание. Этот метод позволяет фракционировать аэрозольные частицы по размеру.

Критерии оценки загрязненности воздуха:

• Общее количество микроорганизмов (общее микробное число, ОМЧ, или МАФАнМ): Количество колониеобразующих единиц в 1 м³ воздуха, выраженное в КОЕ/м³.
• Наличие санитарно-показательных микроорганизмов: К ним относятся патогенные стафилококки (особенно коагулазоположительные, гемолитические Staphylococcus aureus), стрептококки, а также плесневые и дрожжевые грибы. Их присутствие указывает на неблагоприятную санитарно-эпидемиологическую ситуацию.

Допустимые уровни бактериальной обсемененности воздуха в ЛПУ (согласно СанПиН 2.1.3.1375-03 и другим нормативным документам):

Помещения ЛПУ подразделяются на классы чистоты в зависимости от их функционального назначения:

• Особо чистые (класс А): Операционные, родильные залы, асептические боксы.
  • До начала работы: не более 200 КОЕ/м³.
  • Во время работы: не более 500 КОЕ/м³.
  • Staphylococcus aureus, плесневые и дрожжевые грибы: должны отсутствовать.
  • Периодичность контроля: 1 раз в месяц.
• Чистые (класс Б): Процедурные, перевязочные, реанимационные, детские палаты.
  • До начала работы: не более 500 КОЕ/м³.
  • Во время работы: не более 750 КОЕ/м³.
  • Staphylococcus aureus, плесневые и дрожжевые грибы: должны отсутствовать.
  • Периодичность контроля: 1 раз в месяц.
• Условно-чистые (класс В): Палаты хирургических отделений, коридоры, смотровые.
  • До начала работы: не более 750 КОЕ/м³.
  • Во время работы: не более 1000 КОЕ/м³.
  • Staphylococcus aureus: не должен быть обнаружен до начала работы и не более 2 КОЕ/м³ во время работы.
  • Плесневые и дрожжевые грибы: должны отсутствовать.
• Грязные (класс Г): Коридоры, административные помещения, санитарные комнаты.
  • Нормативы не регламентируются, но контроль может проводиться по эпидемиологическим показаниям.

Плановые исследования воздуха на общую бактериальную обсемененность и наличие золотистого стафилококка в особо чистых и чистых помещениях (операционные, родильные залы, реанимационные палаты, детские палаты) проводятся 1 раз в месяц. Увеличение количества патогенных стафилококков, особенно полирезистентных к антибиотикам форм, является серьезным предвестником внутрибольничных инфекций, требующим немедленного вмешательства.

Вирусы в мире бактерий и человека: бактериофаги и вирусы гриппа

Вирусы, эти удивительные и порой смертоносные агенты, занимают особое место в биологическом мире, являясь облигатными внутриклеточными паразитами. Их влияние простирается от микроскопического мира бактерий, где они известны как бактериофаги, до макромира человека, вызывая такие повсеместные заболевания, как грипп. Понимание их строения, жизненных циклов и механизмов взаимодействия с клетками-хозяевами критически важно для медицины и биотехнологий.

Бактериофаги: строение и взаимодействие с бактериальной клеткой

Бактериофаги, часто называемые просто фагами, представляют собой вирусы, которые избирательно поражают бактериальные клетки. Их название буквально означает «пожиратели бактерий», что точно отражает их способность разрушать бактерии. Они были открыты независимо Фредериком Туортом в 1915 году и Феликсом Д’Эреллем в 1917 году.

Строение вириона бактериофага:

Типичный вирион бактериофага, особенно классический Т-четный фаг (например, Т2, Т4), имеет очень специфическую и сложную структуру, напоминающую миниатюрный космический аппарат:

• Головка (капсид): Представляет собой многогранную или икосаэдрическую структуру (может быть также округлой, гексагональной или палочковидной формы). Внутри головки находится генетический материал фага — одноцепочечная или двуцепочечная нуклеиновая кислота (ДНК или, реже, РНК), которая окружена белковой оболочкой (капсидом) или липопротеиновой оболочкой. В составе некоторых фагов вместо цитозина может присутствовать 5-оксиметилцитозин, а внутри головки фага Т2 обнаружен белок с полиамидами, способствующий суперспирализации ДНК.
• Хвостовой отросток: Является по существу полой трубкой, через которую генетический материал впрыскивается в бактериальную клетку. Эта трубка окружена сократительным белковым чехлом. Сократительный чехол хвостового отростка бактериофага состоит из множества копий белковых субъединиц, которые прикреплены к хвостовой трубке и базальной пластинке. Он способен сокращаться, подобно пружине, впрыскивая генетический материал.
• Базальная пластинка и хвостовые нити: На конце хвостового отростка у многих бактериофагов имеется базальная пластинка с шестью тонкими длинными нитями, которые играют ключевую роль в распознавании и прикреплении фага к бактериальной клетке.

Химический состав: Общее количество белка в частице фага составляет 50-60%, а нуклеиновых кислот — 40-50%. В частицах многих фагов под чехлом присутствует фермент лизоцим (мурамидаза), который играет важную роль на этапе инъекции ДНК и лизиса бактериальной клетки.

Взаимодействие с бактериальной клеткой:

Бактериофаги являются облигатными внутриклеточными паразитами, что означает их полную неспособность к самостоятельному размножению вне живой клетки-хозяина. Их жизненный цикл начинается с:

1. Адсорбция: Бактериофаг специфически прикрепляется к поверхности бактериальной клетки. Это происходит за счет связывания хвостовых нитей или базальной пластинки фага с фагоспецифическими рецепторами на поверхности бактерии. Рецепторами могут выступать компоненты клеточной стенки (например, липополисахариды, порины) или даже жгутики. Специфичность адсорбции определяет круг хозяев фага.
2. Инъекция генетического материала: После адсорбции сократительный чехол хвостового отростка сокращается, и ДНК (или РНК) фага впрыскивается через полую трубку хвоста непосредственно в цитоплазму бактерии. Капсид при этом остается снаружи.

Литический и лизогенный циклы, фаговая конверсия

По характеру взаимодействия с бактериальной клеткой бактериофаги делятся на две основные группы:

• Вирулентные фаги: Эти фаги размножаются исключительно по литическому циклу. После инъекции генетического материала фаг полностью перехватывает метаболическую машину бактериальной клетки, заставляя ее синтезировать фаговые белки и нуклеиновые кислоты. В результате, клетка производит множество новых фаговых частиц, которые затем высвобождаются, вызывая лизис (разрушение) бактериальной клетки-хозяина. Этот процесс приводит к гибели бактерии.
• Умеренные (темперированные) фаги: Эти фаги могут развиваться по одному из двух путей: литическому или лизогенному. В лизогенном цикле умеренный фаг встраивает свой геном (называемый профагом) в геном бактерии-хозяина. В таком состоянии профаг реплицируется синхронно с делением бактериальной клетки и не вызывает ее немедленного лизиса. Бактерия, содержащая профаг, называется лизогенной. Под воздействием определенных стрессовых факторов (например, УФ-излучения, некоторых химических агентов) профаг может эксцизироваться (вырезаться) из бактериальной хромосомы и перейти к литическому циклу, что приведет к лизису клетки.

Фаговая (лизогенная) конверсия: Это явление, при котором умеренный фаг может принести новые свойства бактериальной клетке-хозяину. Фаг может захватить часть хромосомы бактерии и перенести ее в другую клетку. Это происходит, например, через специализированную трансдукцию, при которой умеренный фаг, выходя из лизогенного состояния, ошибочно вырезает из бактериальной хромосомы не только свой геном, но и прилегающие к нему бактериальные гены. Эти гены затем переносятся в новую бактериальную клетку вместе с фаговым геномом. Фаговая конверсия является мощным фактором изменчивости микроорганизмов, способствуя приобретению ими новых свойств, таких как токсигенность (например, дифтерийный токсин) или устойчивость к антибиотикам, что имеет огромное эпидемиологическое и клиническое значение.

Вирусы гриппа: биологические особенности и эпидемиология

Грипп — это острая респираторная вирусная инфекция (ОРВИ), вызываемая РНК-содержащими вирусами гриппа, которые относятся к семейству Orthomyxoviridae. Выделяют три основных типа вируса гриппа: А, В и С, каждый из которых имеет свои эпидемиологические и клинические особенности.

Биологические особенности:

• Типы вируса:
  • Тип А: Наиболее изменчив и является причиной большинства крупномасштабных эпидемий и пандемий. Классифицируется по поверхностным антигенам: гемагглютинину (HA) и нейраминидазе (NA). Существует 18 подтипов HA и 11 подтипов NA, но лишь некоторые из них циркулируют среди людей (например, H1N1, H3N2).
  • Тип В: Менее изменчив, вызывает региональные эпидемии, но не пандемии. Не классифицируется по подтипам HA и NA.
  • Тип С: Наименее изменчив, вызывает легкие заболевания, не приводит к эпидемиям.
• Высокая изменчивость: Вирусы гриппа, особенно типы А и В, обладают высокой изменчивостью, что объясняет ежегодные эпидемии и затрудняет формирование коллективного иммунитета, а также требует ежегодного обновления вакцин. Эта изменчивость обусловлена двумя основными механизмами:
  • Антигенный дрейф (antigenic drift): Это незначительные точечные мутации (point mutations) в генах, кодирующих поверхностные белки — гемагглютинин (HA) и нейраминидазу (NA). Эти мутации приводят к небольшим изменениям в антигенных свойствах вируса, позволяя ему уклоняться от уже сформированного иммунного ответа, что вызывает сезонные эпидемии.
  • Антигенный шифт (antigenic shift): Это более радикальные изменения, которые происходят только у вируса гриппа А. Они обусловлены реассортацией (обменом) сегментов РНК-генома между различными штаммами вируса гриппа А, часто между вирусами человеческого и животного происхождения. Это приводит к появлению нового подтипа вируса с существенно измененными HA и/или NA, к которому у населения отсутствует иммунитет, что может вызывать пандемии.

Эпидемиология:

• Источник инфекции: Единственным источником инфекции для человеческого гриппа является больной человек, в том числе с манифестной (явно выраженной) или стертой (бессимптомной или малосимптомной) формой заболевания. Вирус гриппа А также имеет природные резервуары в организмах животных, таких как водоплавающие птицы и свиньи, что способствует его мутациям и появлению новых штаммов, способных к передаче человеку.
• Локализация возбудителя: Возбудитель гриппа сосредоточен в эпителиальных клетках верхних дыхательных путей больного (нос, носоглотка), откуда активно выделяется в окружающую среду.

Пути передачи гриппа:

• Воздушно-капельный путь: Является основным путем передачи. Вирус передается с микрочастицами слюны, слизи и мокроты, выделяемыми при дыхании, кашле, чихании и разговоре.
  • Крупные капли (более 5 мкм): Распространяются при кашле и чихании на расстояние до 1-2 метров и быстро оседают на поверхности.
  • Мелкие аэрозольные частицы (менее 5 мкм): Способны дольше находиться в воздухе и переноситься на большие расстояния, что способствует более широкому распространению инфекции.
• Контактный путь: Осуществляется через поверхности и предметы, к которым прикасался больной (посуда, полотенца, дверные ручки, гаджеты), а также при прямом контакте (например, рукопожатия, объятия). Вирус может сохраняться на поверхностях в течение нескольких часов, а затем попасть на слизистые оболочки здорового человека через руки.

Патогенез и профилактика гриппа

Патогенез гриппа:

Развитие гриппа начинается с момента проникновения вируса в организм и его взаимодействия с клетками дыхательных путей:

1. Адгезия и проникновение: Вирус гриппа прикрепляется к рецепторам сиаловой кислоты на поверхности эпителиальных клеток дыхательных путей с помощью своего поверхностного белка — гемагглютинина (HA). Затем вирус проникает в клетку путем эндоцитоза.
2. Репликация: После слияния вирусной оболочки с мембраной эндосомы, вирусный геном (РНК) высвобождается в цитоплазму, а затем транспортируется в ядро клетки, где происходит его репликация и синтез вирусных белков.
3. Высвобождение вирионов: Новые вирусные частицы собираются и отпочковываются от инфицированной клетки. Нейраминидаза (NA), еще один поверхностный белок вируса, играет ключевую роль в этом процессе, разрушая сиаловую кислоту на поверхности клетки и предотвращая агрегацию новых вирионов.
4. Развитие симптомов: Размножение вируса в эпителиальных клетках верхних дыхательных путей приводит к их повреждению и гибели, что вызывает воспалительную реакцию. Заболевание начинается с острого синдрома интоксикации: резкого подъема температуры тела, выраженной головной боли, ломоты в мышцах и суставах, общей слабости и упадка сил. Затем присоединяются катаральные проявления, такие как сухой кашель, першение и боли в горле, насморк.
5. Осложнения: Тяжелое течение гриппа может привести к серьезным осложнениям, особенно у лиц из групп риска (дети, пожилые, люди с хроническими заболеваниями). К ним относятся:
   • Респираторные: первичная вирусная пневмония, вторичная бактериальная пневмония, бронхит, отит, синусит.
   • Сердечно-сосудистые: миокардит, перикардит.
   • Нервной системы: энцефалит, менингит, синдром Рея (у детей при приеме аспирина).

Профилактика гриппа:

Эффективная профилактика гриппа включает комплекс мер, направленных на снижение риска инфицирования и предотвращение распространения вируса:

1. Вакцинация: Является наиболее эффективным методом профилактики, особенно для групп риска (дети, пожилые, беременные, лица с хроническими заболеваниями и медицинские работники).
   • Типы вакцин: Существуют различные типы вакцин против гриппа, включая инактивированные (цельновирионные, расщепленные, субъединичные, полимерные) и живые аттенуированные вакцины.
   • Эффективность: Эффективность вакцинации против гриппа варьируется в зависимости от сезона и степени соответствия вакцинного штамма циркулирующим вирусам, составляя в среднем от 40% до 60% в предотвращении заболевания и значительно выше в предотвращении тяжелых форм и осложнений.
2. Изоляция больных: Ранняя изоляция больного человека и ограничение его контактов помогают предотвратить распространение инфекции.
3. Использование медицинских масок: Ношение масок больными и лицами, осуществляющими уход, снижает выброс вирусных частиц в воздух.
4. Гигиена рук и поверхностей: Регулярное мытье рук с мылом или использование антисептиков, а также дезинфекция часто касаемых поверхностей снижают риск контактной передачи вируса.
5. Общеукрепляющие меры: Поддержание здорового образа жизни, полноценное питание, достаточный сон и физическая активность способствуют укреплению иммунитета.

Взаимодействие микроорганизма и макроорганизма: патогенность, вирулентность и неспецифический иммунитет

Взаимодействие между микроорганизмами и макроорганизмом представляет собой сложную динамическую систему, в которой баланс между способностью микроба вызывать болезнь и способностью хозяина сопротивляться определяет исход этого взаимодействия. В основе этого лежит понимание патогенности и вирулентности микроорганизмов, а также механизмов неспецифической резистентности организма.

Патогенность и вирулентность

Эти два термина часто используются как синонимы, но в микробиологии они имеют четкие, хотя и взаимосвязанные, значения.

• Патогенность (от греч. pathos — страдание, genos — рождающий) — это генетически заложенная видовая способность микроорганизма вызывать инфекционный процесс или заболевание в чувствительном организме. Это качественный признак, то есть вид либо патогенен, либо нет. Например, Mycobacterium tuberculosis патогенна для человека, а Lactobacillus spp. — нет. Патогенность относительна и зависит не только от микроорганизма, но и от вида, возраста, пола и физиологического состояния инфицируемого организма. Один и тот же микроб может быть патогенным для одного вида животных и безвредным для другого.
• Вирулентность (от лат. virulentus — ядовитый) — это степень патогенности данного штамма микроорганизма или вируса, мера его болезнетворности. Вирулентность является количественным признаком и может значительно колебаться у представителей одного и того же вида микроорганизма. Например, один штамм Staphylococcus aureus может быть высоко вирулентным и вызывать тяжелые инфекции, тогда как другой штамм того же вида может быть менее вирулентным.

Единицы измерения вирулентности:

Для количественной оценки вирулентности используют различные единицы, обычно определяемые в экспериментах на лабораторных животных:

• Летальная доза (LD, от лат. Dosis letalis): Наименьшее количество патогенных микроорганизмов или токсина, способное вызвать гибель определенного количества лабораторных животных.
• LD₅₀ (полулетальная доза): Наиболее часто используемая единица измерения вирулентности. Это количество микроорганизмов (или токсина), вызывающее гибель 50% экспериментально зараженных лабораторных животных. Чем меньше значение LD₅₀, тем выше вирулентность штамма.
• DCL (dosis certa letalis): Количество микробов или токсина, вызывающее гибель 100% инфицированных лабораторных животных.
• Инфицирующая доза (ID, от англ. infectious dose): Минимальное количество патогенных микроорганизмов, способное вызвать развитие заболевания (не обязательно летального исхода) у определенного количества лабораторных животных (например, ID₅₀ — вызывает заболевание у 50% животных, ID₁₀₀ — у 100%).

Факторы патогенности микроорганизмов

Патогенность микроорганизмов обусловлена наличием у них различных факторов, позволяющих им преодолевать защитные барьеры хозяина, закрепляться, размножаться и вызывать повреждения.

1. Способность к адгезии (прикреплению) и колонизации: Первым шагом для развития инфекции является адгезия микроорганизма к клеткам слизистой оболочки или другим тканям хозяина. Это обеспечивается специфическими молекулами на поверхности бактерий, называемыми адгезинами, которые связываются с комплементарными рецепторами на поверхности клеток хозяина. К адгезинам относятся фимбрии (пили), белки наружной мембраны, адгезивные молекулы на капсуле или гликокаликсе, а также липополисахариды (ЛПС) грамотрицательных бактерий.
2. Инвазивность: Способность проникать в ткани организма и распространяться в них. Инвазивность обеспечивается белками наружной мембраны и ферментами, продуцируемыми микроорганизмами. Примеры таких ферментов:
   • Гиалуронидаза: Расщепляет гиалуроновую кислоту — основной компонент межклеточного матрикса соединительной ткани, облегчая распространение.
   • Нейраминидаза: Разрушает сиаловые кислоты на поверхности клеток, способствуя распространению (например, у вирусов гриппа).
   • Протеазы, коллагеназа, эластаза: Разрушают белки тканей, способствуя инвазии.
   • Коагулаза: Свертывает плазму крови, образуя фибриновый барьер вокруг бактерий, защищая их от фагоцитоза.
   • Фибринолизин: Растворяет фибриновые сгустки, способствуя распространению из зоны инфекции.
3. Токсигенность: Способность вырабатывать токсины, которые вызывают глубокие нарушения жизнедеятельности организма хозяина. Токсины делятся на:
   • Экзотоксины: Белки, секретируемые живыми бактериями во внешнюю среду. Обладают высокой специфичностью действия (например, нейротоксины, энтеротоксины, цитотоксины), обычно термолабильны (разрушаются при нагревании) и высокотоксичны (например, ботулотоксин, столбнячный токсин, дифтерийный токсин).
   • Эндотоксины: Являются липополисахаридами (ЛПС) клеточной стенки грамотрицательных бактерий. Высвобождаются при лизисе клеток. Вызывают общие, неспецифические реакции организма (лихорадка, воспаление, септический шок). Термостабильны и менее токсичны, чем экзотоксины.
4. Антифагоцитарные факторы: Механизмы, препятствующие поглощению микроорганизмов фагоцитами хозяина. К ним относятся:
   • Капсулы: Полисахаридные или полипептидные оболочки, которые делают бактерии более скользкими и затрудняют их захват фагоцитами.
   • Белок А: У Staphylococcus aureus связывает Fc-фрагмент антител, предотвращая опсонизацию и фагоцитоз.
   • Компоненты клеточной стенки: Например, М-белок у стрептококков.
5. Способность к длительному персистированию в организме хозяина: Механизмы персистенции позволяют микроорганизмам уклоняться от иммунного ответа и выживать в организме в течение длительного времени, вызывая хронические инфекции. Они включают:
   • Формирование биопленок: Сообщества микроорганизмов, заключенные в матрикс из внеклеточного полимерного вещества, что обеспечивает защиту от антибиотиков и иммунных клеток.
   • Внутриклеточное выживание: Некоторые патогены способны выживать и размножаться внутри фагоцитов (например, Mycobacterium tuberculosis) или других клеток.
   • Изменение антигенных свойств (антигенная вариация): Позволяет микроорганизмам «прятаться» от иммунной системы, изменяя свои поверхностные антигены.
   • Переход в метаболически неактивное состояние: Состояние «сна» (персистенции) делает их нечувствительными к антибиотикам, действующим на активно делящиеся клетки.

Механические и физико-химические барьеры неспецифической резистентности

Неспецифическая резистентность (врожденный иммунитет) представляет собой первую линию защиты организма от широкого круга патогенов. Она не обладает памятью и направлена на общие структуры микроорганизмов.

Механические барьеры:

1. Кожа: Неповрежденный кожный покров является мощным механическим барьером. Это многослойный эпителий, обычно непроницаемый для большинства микробов и макромолекул. Постоянное слущивание ороговевших клеток эпидермиса удаляет микроорганизмы.
2. Слизистые оболочки: Выстилают внутренние поверхности тела (дыхательные пути, желудочно-кишечный тракт, мочеполовая система). Они также представляют собой многослойный эпителий.
   • Волоски: В носовых ходах задерживают крупные частицы и микроорганизмы.
   • Реснички мерцательного эпителия: В дыхательных путях создают мукоцилиарный клиренс, постоянно выталкивая слизь с захваченными микробами вверх, к глотке, откуда они либо проглатываются, либо откашливаются.
   • Секреция слизи: Слизь улавливает микроорганизмы и содержит антимикробные вещества.

Физико-химические барьеры:

1. Секреты кожных желез:
   • Потовые железы: Выделяют пот, содержащий уксусную, муравьиную и молочную кислоты, которые создают кислую среду (pH 3-5), неблагоприятную для роста многих бактерий.
   • Сальные железы: Вырабатывают кожное сало, обладающее бактерицидными свойствами.
2. Кислый желудочный сок: Желудок представляет собой мощный химический барьер. Его кислая среда (pH 1.5-2.5) и ферменты (пепсин) инактивируют и разрушают большинство микробов, проникающих перорально.
3. Кишечник:
   • Ферменты: В кишечнике действуют пищеварительные ферменты (трипсин, панкреатин, липаза, амилазы), которые разрушают микробные клетки.
   • Желчь: Обладает бактерицидными свойствами.
   • Бактериоцины: Продуцируются нормальной микрофлорой кишечника, подавляя рост патогенов.
4. Лизоцим (мурамидаза): Фермент, широко распространенный в организме (кровь, слюна, слезы, слизь, фагоциты). Лизоцим гидролизует β(1→4)-гликозидные связи между N-ацетилмурамовой кислотой и N-ацетилглюкозамином в пептидогликане клеточной стенки бактерий, что приводит к разрушению клеточной стенки и гибели бактерий, особенно грамположительных. Является важным фактором местного иммунитета.
5. Система комплемента: Группа из более чем 30 белков крови, которые активируются по классическому, альтернативному или лектиновому пути. Её основные функции включают:
   • Лизис клеток-мишеней: Образование мембраноатакующего комплекса (МАК), который создает поры в мембране бактерий, приводя к их лизису.
   • Опсонизация: Покрытие микроорганизмов фрагментами комплемента (например, C3b), что усиливает фагоцитоз.
   • Участие в воспалительных реакциях: Привлечение иммунных клеток к очагу инфекции.
6. Интерфероны: Белки с противовирусными свойствами. Вырабатываются почти всеми ядросодержащими клетками в ответ на вирусную инфекцию. Делятся на три основных типа:
   • Тип I (интерфероны α и β): Вырабатываются инфицированными клетками, подавляют репликацию вирусов, индуцируя синтез антивирусных белков в незараженных клетках и модулируя иммунный ответ.
   • Тип II (интерферон γ): Продуцируется иммунными клетками (Т-лимфоцитами и NK-клетками), активирует макрофаги и усиливает клеточный иммунитет.
7. Фагоциты: Специализированные клетки иммунной системы (нейтрофилы, моноциты, макрофаги, дендритные клетки), которые поглощают (фагоцитируют) и переваривают чужеродные микроорганизмы и частицы. Этот процесс является ключевым в неспецифической защите.
8. Нормальная микрофлора: Совокупность микроорганизмов, постоянно обитающих на коже и слизистых оболочках. Она создает конкуренцию патогенам, занимая сайты адгезии и конкурируя за питательные вещества. Кроме того, нормальная микрофлора продуцирует антимикробные вещества, такие как бактериоцины, органические кислоты (например, молочная, уксусная) и перекись водорода, которые подавляют рост патогенных микроорганизмов.

Частная микробиология: возбудитель дизентерии (шигеллы)

Дизентерия, или шигеллез, остается одной из актуальных проблем здравоохранения, особенно в регионах с низким уровнем санитарии. Это острое инфекционное заболевание желудочно-кишечного тракта, вызываемое бактериями рода Shigella. Детальное изучение этих микроорганизмов, их биологических особенностей, механизмов передачи и патогенеза является ключом к эффективной диагностике, лечению и профилактике.

Биологические особенности шигелл

Возбудителями дизентерии являются бактерии рода Shigella, входящие в семейство Enterobacteriaceae. Это близкие родственники Escherichia coli, но с принципиальными отличиями в патогенности и метаболизме.

• Морфология и тинкториальные свойства: Шигеллы — это грамотрицательные, неподвижные палочковидные бактерии с закругленными концами, размером 2-3 мкм в длину и 0.5-0.7 мкм в ширину. Отсутствие жгутиков отличает их от многих других энтеробактерий.
• Отсутствие спор и капсул: Шигеллы не образуют спор, что делает их относительно чувствительными к неблагоприятным условиям внешней среды, и, как правило, не формируют полноценных капсул, хотя у некоторых видов может присутствовать тонкий капсулярный слой (гликокаликс).
• Тип дыхания: Они являются факультативными анаэробами, что означает их способность получать энергию как за счет брожения (в отсутствии кислорода), так и за счет дыхания (при его наличии). Это позволяет им выживать в различных условиях кишечника.
• Рост на питательных средах: Шигеллы хорошо растут на обычных питательных средах (например, мясопептонном агаре). Однако их способность к сбраживанию углеводов слабее, чем у многих других энтеробактерий. Шигеллы ферментируют глюкозу с образованием кислоты без газа. В отличие от большинства других энтеробактерий, они обычно не ферментируют лактозу (за исключением S. sonnei, которая ферментирует лактозу медленно, в течение 48 часов) и не образуют сероводород. Также у S. dysenteriae отсутствуют пермеазы для транспорта галактозы.
• Видовое разнообразие: Род Shigella включает четыре основных вида (серогруппы), различающиеся по антигенной структуре и клиническому значению:
  • Shigella dysenteriae (серогруппа А): часто вызывает наиболее тяжелые формы дизентерии, особенно серовар 1.
  • Shigella flexneri (серогруппа B): широко распространена в развивающихся странах.
  • Shigella boydii (серогруппа C).
  • Shigella sonnei (серогруппа D): наиболее распространенный вид в развитых странах, вызывает более легкие формы заболевания.

Факторы вирулентности и токсины

Вирулентность шигелл определяется сложным набором факторов, позволяющих им вызывать патологический процесс:

1. Адгезия: Способность к прикреплению к эпителиальным клеткам толстой кишки является первым шагом в инфекции.
2. Инвазия и внутриклеточное размножение: Это ключевой фактор патогенности. Шигеллы обладают уникальной способностью проникать в эпителиальные клетки толстой кишки и резидентные макрофаги, где они размножаются. Они используют систему секреции III типа для инъекции своих белков в клетку-хозяина, что приводит к перестройке актинового цитоскелета и инвазии. Внутриклеточный паразитизм позволяет шигеллам уклоняться от иммунного ответа и способствует развитию хронической формы заболевания.
3. Образование токсинов: Шигеллы продуцируют различные токсины:
   • Шига-токсин (Stx): Продуцируется Shigella dysenteriae серовара 1. Это мощный белковый экзотоксин, классифицируемый как нейротоксин и цитотоксин. Шига-токсин представляет собой AB₅-токсин, состоящий из одной А-субъединицы и пяти В-субъединиц. В-субъединицы связываются с рецептором Глоботриаозилцерамидом (Gb3), расположенным на поверхности эндотелиальных клеток сосудов почек и кишечника. После связывания А-субъединица проникает внутрь клетки, где она ферментативно инактивирует 28S рибосомальную РНК, что приводит к ингибированию синтеза белка и гибели клетки.
   • Шигаподобные токсины (SLT-2): Вырабатываются другими видами шигелл. Они структурно и функционально схожи с Шига-токсином, но обычно менее токсичны.
   • Эндотоксин (ЛПС): Как грамотрицательные бактерии, шигеллы содержат липополисахарид в своей клеточной стенке, который высвобождается при гибели бактерий и вызывает общие симптомы интоксикации (лихорадка, слабость).
   • Энтеротоксины: Некоторые шигеллы также продуцируют энтеротоксины (например, ShET1, ShET2), которые вызывают секрецию жидкости и электролитов в просвет кишечника, способствуя развитию диареи.

Резистентность во внешней среде и эпидемиология

Резистентность шигелл во внешней среде: Шигеллы обладают невысокой устойчивостью к неблагоприятным химическим и физическим факторам. Они чувствительны к прямым солнечным лучам (погибают в течение 30 минут) и нагреванию (при 60°C погибают через 30 минут, при 100°C — мгновенно). Однако, они могут хорошо переносить высушивание и низкие температуры, сохраняя жизнеспособность от нескольких дней до нескольких месяцев в благоприятных условиях.

• В канализационных стоках: до 25-30 дней.
• В почве: до 3-4 месяцев.
• На предметах обихода и детских игрушках: несколько дней или месяцев.
• На фруктах и овощах: до 2 недель.
• В высохших испражнениях: до 4-5 месяцев.
• В воде: до 2-3 месяцев.
• В молоке и молочных продуктах, мясных и овощных салатах, фарше шигеллы (особенно S. sonnei) способны не только сохраняться, но и активно размножаться, что делает эти продукты опасными факторами передачи.

Шигеллы чувствительны к обычным концентрациям дезинфицирующих средств (например, растворы хлорамина 0.5-1%), а также к растворам фенола, лизола и четвертичных аммониевых соединений. Однако, они часто приобретают множественную лекарственную устойчивость к антибиотикам путем передачи генов через трансмиссивные плазмиды от других кишечных бактерий, что затрудняет лечение. S. sonnei является наиболее устойчивым к внешним воздействиям видом шигелл, тогда как S. dysenteriae — наименее устойчивым.

Источники, пути и механизмы передачи дизентерии:

• Источник возбудителя: Единственным источником возбудителя шигеллеза является человек — больной манифестной (острой) или стертой формой болезни, а также бактериовыделитель (реконвалесцент или хронический носитель). Наибольшую эпидемическую опасность представляют лица, работа которых связана с приготовлением, хранением, транспортировкой и продажей пищевых продуктов, а также работники водопроводных и канализационных сооружений.
• Механизм передачи: Фекально-оральный (через загрязненные руки, воду, пищу).
• Пути передачи:
  • Контактно-бытовой путь: Наиболее характерен для S. dysenteriae 1 и часто встречается среди детей, пожилых и ослабленных больных, где передача происходит через загрязненные руки, предметы обихода.
  • Пищевой путь: Наиболее характерен для S. sonnei, особенно через инфицированные молочные продукты, салаты, фарш, где шигеллы могут размножаться.
  • Водный путь: Наиболее характерен для S. flexneri и S. boydii, особенно через загрязненную воду.
• Насекомые-переносчики: Мухи и тараканы могут играть определенную роль в распространении инфекции, являясь механическими переносчиками шигелл с инфицированных фекалий на пищевые продукты и предметы обихода.
• Инфицирующая доза: Для шигелл характерна крайне малая инфицирующая доза: для S. dysenteriae она составляет всего 10 микробных клеток, а для S. sonnei и S. flexneri — 100-200 микробных клеток. Это объясняет высокую контагиозность заболевания.

Патогенез и лабораторная диагностика

Патогенез дизентерии:

1. Проникновение: После попадания в организм шигеллы проходят желудочный барьер и проксимальные отделы тонкой кишки благодаря относительной резистентности к кислому желудочному соку и желчным кислотам.
2. Инвазия и размножение: Ключевым фактором патогенеза является инвазивность шигелл. Они проникают в эпителиальные клетки дистального отдела толстой кишки (преимущественно сигмовидной и прямой) и резидентные макрофаги, где активно размножаются.
3. Повреждение клеток и воспаление: Внутриклеточное размножение и высвобождение токсических субстанций (экзо- и эндотоксинов, цитотоксинов, энтеротоксинов) приводят к разрушению эпителиальных клеток, развитию острого воспаления, отека и образованию язв в слизистой оболочке толстой кишки.
4. Синдром интоксикации: Высвобождаемые токсины инициируют синдром интоксикации, который часто предшествует диарейному синдрому. Цитотоксины, такие как Шига-токсин, повреждают мембраны эпителиальных клеток, а энтеротоксины усиливают секрецию жидкости и электролитов в просвет кишечника, вызывая водянистую диарею.
5. Клинические проявления: Характерные симптомы включают боли в животе, тенезмы (ложные позывы к дефекации), частый жидкий стул с примесью слизи и крови, лихорадку, слабость, головную боль.
6. Системная диссеминация: Системная диссеминация возбудителя при шигеллезе, как правило, не происходит, за исключением случаев, вызванных S. dysenteriae 1, когда Шига-токсин может попадать в кровоток и вызывать серьезные осложнения, такие как гемолитико-уремический синдром.
7. Хронизация: Внутриклеточный паразитизм шигелл способствует переходу острой формы заболевания в хроническую, а также длительному бактерионосительству.
8. Осложнения: Могут включать дисбактериоз, кишечные кровотечения, прободение стенки кишечника, инфекционно-токсический шок, перитонит, парезы кишечника, геморрой, анальные трещины, выпадение прямой кишки. При инфицировании S. dysenteriae 1 наиболее опасным осложнением является гемолитико-уремический синдром, характеризующийся острой почечной недостаточностью, гемолитической анемией и тромбоцитопенией.

Принципы лабораторной диагностики шигеллеза:

Эффективная диагностика шигеллеза требует комплексного подхода:

1. Материал для исследования: Образцы фекалий (предпочтительно свежие, взятые в первые дни заболевания, до начала антибактериальной терапии), ректальные мазки, а также промывные воды желудка при подозрении на пищевое отравление.
2. Бактериологический посев: «Золотой стандарт» диагностики. Включает выделение чистой культуры шигелл с последующей биохимической и серологической идентификацией микроорганизма.
   • Питательные среды: Используются дифференциально-диагностические среды (например, Эндо, Плоскирева, Левина), которые позволяют отличить шигеллы от других кишечных бактерий по способности ферментировать лактозу. Также применяются среды обогащения (20% желчный бульон, комбинированная среда Кауфмана, селенитовый бульон) для увеличения количества шигелл из скудного материала.
   • Биохимическая идентификация: Определение ферментативной активности (сбраживание углеводов, образование сероводорода, индола и др.).
   • Серологическая идентификация: Агглютинация выделенной культуры специфическими сыворотками к О-антигенам шигелл.
3. Молекулярные методы (ПЦР): Полимеразная цепная реакция используется для обнаружения ДНК патогена в кале. Целесообразна для скрининговых исследований, особенно при малых концентрациях возбудителя, или после начала антибактериальной терапии, когда выделение живой культуры затруднено.
4. Серологическое исследование: Направлено на выявление специфических антител к шигеллам в крови пациента (например, методом реакции пассивной гемагглютинации, РПГА). Диагностическим считается нарастание титра антител в динамике или однократный титр более 1:200. Этот метод имеет ретроспективное значение, так как антитела появляются не сразу.
5. Дополнительные методы:
   • Копрограмма: Обнаружение лейкоцитов, эритроцитов, слизи в кале, что указывает на воспаление в кишечнике.
   • Общий анализ крови: Лейкоцитоз, сдвиг лейкоцитарной формулы влево.
   • Ректороманоскопия: Эндоскопическое исследование прямой и сигмовидной кишки, позволяющее визуализировать воспалительные изменения слизистой оболочки.

Принципы обеззараживания: стерилизация и дезинфекция в медицине

В борьбе с инфекционными заболеваниями и для обеспечения безопасности пациентов и медицинского персонала критически важными являются процессы обеззараживания — дезинфекция и стерилизация. Несмотря на кажущуюся схожесть, эти понятия имеют принципиальные различия в целях, методах и степени уничтожения микроорганизмов. Понимание этих различий и правильное применение соответствующих методов лежат в основе асептики и антисептики в медицине.

Дезинфекция: определение, виды и методы

Дезинфекция (от фр. désinfection — уничтожение инфекции) — это комплекс мероприятий, направленный на уничтожение возбудителей инфекционных заболеваний (бактерий, вирусов, грибов) и разрушение токсинов на объектах внешней среды (поверхности, инструменты, выделения) для предотвращения их попадания на кожу, слизистые оболочки и раневую поверхность человека. Главное отличие дезинфекции от стерилизации заключается в том, что она уменьшает количество микроорганизмов до приемлемого, безопасного уровня, но не всегда гарантирует полное уничтожение всех форм микроорганизмов, особенно их споровых форм, которые обладают высокой устойчивостью.

Виды дезинфекции:

1. Профилактическая дезинфекция: Проводится регулярно в местах массового скопления людей (больницы, школы, общественный транспорт, предприятия общественного питания) независимо от наличия случаев инфекции. Цель — предотвратить возникновение инфекций.
2. Очаговая дезинфекция:
   • Текущая очаговая дезинфекция: Проводится в присутствии источника инфекции (больного человека) для немедленного обеззараживания выделений больного (мокрота, испражнения, рвотные массы), предметов ухода, постельного белья, посуды и других объектов, с которыми он контактирует. Цель — предотвратить дальнейшее распространение инфекции от больного.
   • Заключительная очаговая дезинфекция: Проводится после изоляции, госпитализации, выздоровления или смерти больного в очаге инфекции. Ее цель — полное уничтожение возбудителя, который мог остаться на объектах внешней среды, чтобы исключить возможность заражения других лиц.

Методы дезинфекции:

1. Механический метод: Включает удаление микроорганизмов с поверхностей путем мытья, протирания, влажной уборки, пылесосения, фильтрации воздуха. Это самый простой, но наименее эффективный метод, который лишь уменьшает количество микробов.
2. Физический (термический) метод: Основан на использовании высокой температуры или излучения.
   • Кипячение: Эффективно уничтожает вегетативные формы бактерий, многие вирусы и грибы.
   • Обжиг, прокаливание: Используется для обеззараживания металлических инструментов.
   • Облучение УФ-светом: Ультрафиолетовые лампы используются для обеззараживания воздуха и поверхностей в помещениях.
   • Пастеризация: Нагревание жидкостей (например, молока) до температуры ниже 100°C в течение определенного времени для уничтожения патогенных форм.
3. Химический метод: Наиболее распространенный и универсальный. Основан на применении различных химических дезинфицирующих средств (дезинфектантов), которые обладают бактерицидным, вирулицидным, фунгицидным или спорицидным действием. Примеры: хлорсодержащие препараты (хлорамин, гипохлорит натрия), перекись водорода, спирты, фенолы, четвертичные аммониевые соединения, альдегиды.
4. Биологический метод: Использует антагонизм микроорганизмов для подавления роста патогенов. Применяется, например, в очистке сточных вод. В медицине имеет ограниченное применение.
5. Комбинированный метод: Сочетает несколько методов дезинфекции для достижения максимальной эффективности (например, влажная уборка с применением дезинфицирующих растворов).

Применение дезинфекции в медицине: Медицинская дезинфекция осуществляется с использованием разрешенных дезинфицирующих средств в учреждениях здравоохранения. Обязанности по ее проведению возлагаются на средний и младший медицинский персонал под контролем старшего персонала и эпидемиологов.

Стерилизация: определение, термические методы

Стерилизация (от лат. sterilis — бесплодный) — это процесс полного уничтожения всех форм микроорганизмов (включая вегетативные и споровые формы бактерий, грибов, вирусов, прионов) на различных изделиях, поверхностях и в препаратах. Цель стерилизации — полное обезвреживание патогенной и условно-патогенной микрофлоры для исключения возможного заражения пациентов и сотрудников медицинских учреждений инфекциями, связанными с оказанием медицинской помощи (ИСМП). Стерилизации подлежат все изделия, контактирующие с тканями пациента, кровью, инъекционными препаратами или поврежденными слизистыми оболочками.

Виды и методы стерилизации:

Термические методы: Основаны на использовании высокой температуры и являются наиболее распространенными и надежными.

1. Паровой метод (автоклавирование):
   • Использует насыщенный пар под избыточным давлением. Высокая проникающая способность пара и высокая теплоемкость воды обеспечивают эффективное уничтожение микроорганизмов, включая споры.
   • Типичные режимы:
     • 132 °C при давлении 0.2 МПа (2 атм) в течение 20 минут (для большинства изделий).
     • 121 °C при давлении 0.11 МПа (1.1 атм) в течение 45 минут (для термолабильных материалов).
   • Применение: Стерилизация хирургических инструментов, перевязочного материала, белья, стеклянной посуды, резиновых изделий, некоторых растворов.
2. Воздушный метод (сухожаровой шкаф):
   • Применяет горячий сухой воздух. Менее эффективен, чем паровой, из-за низкой теплопроводности воздуха и меньшей проникающей способности. Требует более высоких температур и длительного времени экспозиции.
   • Типичные режимы:
     • 180 °C в течение 60 минут.
     • 160 °C в течение 150 минут.
   • Применение: Стерилизация стеклянной посуды, металлических инструментов, термостойких порошков. Не подходит для материалов, чувствительных к высокой температуре, влаге или легковоспламеняющихся.
3. Гласперленовый (шариковый) метод:
   • Используется для быстрой стерилизации мелких стоматологических и хирургических инструментов. Инструменты погружаются рабочей частью в нагретые до 230-240 °C стеклянные шарики на 5-20 секунд.
   • Применение: Стоматологические боры, мелкие зонды.
4. Инфракрасный метод:
   • Основан на использовании инфракрасного излучения, которое обеспечивает быстрый нагрев поверхности инструментов до высоких температур (например, 200 °C за 20 секунд).
   • Применение: Для металлических изделий, требующих быстрой стерилизации.
5. Тиндализация:
   • Метод фракционной стерилизации, применяемый для стерилизации растворов, неустойчивых к высокой температуре (например, питательные среды с белком, углеводные растворы).
   • Заключается в неоднократном (обычно 3 раза в течение 3 дней) нагревании до 70-100 °C в течение 30-60 минут с промежутками в 24 часа. В промежутках между нагреваниями споры прорастают в вегетативные формы, которые затем уничтожаются при следующем нагревании.

Химические, радиационные и другие методы стерилизации

Химические методы: Используются для стерилизации термолабильных изделий, которые не выдерживают высоких температур.

1. Газовый метод:
   • Использует газообразные стерилизующие агенты, такие как смеси окиси этилена и углекислого газа, формальдегид или пары перекиси водорода.
   • Процесс происходит при относительно низких температурах (30-55 °C) в течение нескольких часов.
   • Применение: Для термолабильных изделий (например, эндоскопы, пластиковые изделия, электроника), чувствительных к влаге материалов.
2. Стерилизация растворами химических соединений:
   • Используются концентрированные растворы альдегидов (например, 2% глутаровый альдегид), 6% перекиси водорода, надуксусной кислоты.
   • Изделия выдерживаются в растворе при комнатной температуре в течение длительного времени (от 30 минут до нескольких часов) с последующим тщательным промыванием стерильной водой.
   • Применение: Для изделий, которые не могут быть стерилизованы другими методами.

Радиационный метод:

• Использует ионизирующее излучение (гамма-излучение от кобальта-60 или электронно-лучевое излучение).
• Является одним из наиболее эффективных методов, так как обеспечивает стерилизацию изделий в герметичной упаковке без повышения температуры.
• Применение: Широко применяется в промышленности для стерилизации одноразовых медицинских изделий (шприцы, катетеры, перчатки), фармацевтических препаратов и некоторых пищевых продуктов. Его применение в ЛПУ ограничено из-за высокой стоимости оборудования и требований безопасности.

Плазменный метод:

• Осуществляется без значительного повышения температуры (37-60 °C), что делает его идеальным для термочувствительных материалов.
• Использует пары перекиси водорода в условиях вакуума и воздействия электромагнитного поля для образования плазмы. Плазма содержит свободные радикалы (например, гидроксильные радикалы), которые эффективно инактивируют микроорганизмы.
• Применение: Стерилизация эндоскопов, медицинских инструментов с оптикой, электрооборудования, пластиковых и резиновых изделий. Время экспозиции относительно короткое (30-60 минут).

Фильтрационный метод:

• Применяется для стерилизации жидкостей, неустойчивых к нагреванию (например, сыворотки, ферменты, растворы антибиотиков, витаминов).
• Основан на прохождении жидкости через фильтры с очень мелкими порами (обычно 0.22 мкм), которые механически задерживают бактерии и грибы.
• Важно: Фильтрационный метод не задерживает вирусы, так как они значительно меньше пор фильтра.

Ультразвуковая обработка:

• Применяет высокочастотные звуковые волны, создающие микроскопические пузырьки (кавитация), которые разрушают клетки микроорганизмов.
• Применение: Преимущественно используется для предстерилизационной очистки инструментов. Ультразвук эффективно удаляет загрязнения, но не является самостоятельным методом стерилизации, поскольку не гарантирует полного уничтожения всех форм микроорганизмов, включая споры и вирусы.

Области применения в медицине

В медицинской практике строгие правила определения того, что подлежит дезинфекции, а что — стерилизации, основываются на степени контакта изделия с тканями пациента и риске инфицирования:

• Стерилизации подлежат:
  • Все медицинские инструменты, которые проникают в стерильные ткани организма (хирургические инструменты, иглы, скальпели, катетеры, имплантаты).
  • Инструменты и оборудование, контактирующие с кровью или другими стерильными биологическими жидкостями.
  • Диагностическая аппаратура, соприкасающаяся со слизистыми оболочками и способная вызвать их повреждение (например, некоторые виды эндоскопов, требующие стерилизации для исключения передачи высокопатогенных микроорганизмов).
  • Перевязочные и шовные материалы.
  • Фармацевтические препараты (инъекционные растворы).
• Дезинфекции подлежат:
  • Поверхности в помещениях, мебель, оборудование, не контактирующее непосредственно с раневой поверхностью или кровью.
  • Инструменты, контактирующие только с неповрежденной кожей или слизистыми оболочками, не проникая внутрь (например, манжеты для измерения давления, некоторые части фонендоскопа, кушетки).
  • Выделения пациентов.

Строгое соблюдение протоколов дезинфекции и стерилизации является фундаментальным элементом инфекционного контроля и обеспечения безопасности пациентов в любом медицинском учреждении.

Заключение

Путешествие в мир микроорганизмов и иммунитета, предпринятое в рамках данного руководства, ярко демонстрирует безграничную сложность и удивительную взаимосвязь биологических систем. От фундаментальных различий в клеточной организации прокариот и эукариот, определяющих их жизненные стратегии, до тонкостей культивирования бактерий и строгих правил контроля воздушной среды в медицинских учреждениях – каждый аспект микробиологии, иммунологии и вирусологии несет в себе глубокий смысл и практическую значимость.

Мы исследовали мир бактериофагов, поражающих бактерии с элегантной эффективностью, и вирусов гриппа, чья постоянная изменчивость бросает вызов нашим иммунным системам и требует ежегодных усилий в вакцинации. Детальный анализ патогенности и вирулентности микроорганизмов, а также многогранные механизмы неспецифической резистентности организма подчеркивают постоянную борьбу за выживание, ведущуюся на микроскопическом уровне. Наконец, погружение в частную микробиологию на примере возбудителя дизентерии (Shigella) позволило нам проследить весь путь инфекции – от биологических особенностей патогена до механизмов его передачи, патогенеза и современных методов диагностики.

Значение стерилизации и дезинфекции в медицине не может быть переоценено; эти процессы являются не просто рутинными процедурами, а краеугольными камнями асептики, предотвращающими распространение инфекций и спасающими жизни.

Глубокие знания в этих областях – это не просто академическая необходимость для студента медицинского или биологического вуза, выполняющего контрольную работу. Это фундамент профессиональной компетенции будущего специалиста, позволяющий критически мыслить, эффективно принимать решения в сложных клинических ситуациях и вносить вклад в общественное здравоохранение. Понимание этих принципов вооружает нас инструментами для борьбы с болезнями, разработки новых методов диагностики и лечения, а также формирования более здорового будущего.

Список использованной литературы

1. Медицинская микробиология / Гл.Ред. В.И. Покровський, О.К.Поздеев. М.: ГЭТАР МЕДИЦИНА, 1999. 1200 с.
2. Микробиология и иммунология / Под ред. А.А.Воробьева. М.: Медицина, 1999. 464 с.
3. Виестур У.Э., Кузнецов А.М., Савенков В.В. Системы ферментации. Рига: Зинатне, 1986. 174 с.
4. Шлегель Г. Общая микробиология. М.: Мир, 1987. 391 с.
5. Красильников А.П., Романовская Т.Р. Микробиологический словарь-справочник. Минск: Асар, 1999. 310 с.
6. Малов В.А., Горобченко А.Н. Шигеллезы (дизентерия) // Лечащий врач. 2003. №5. URL: https://www.lvrach.ru/2003/05/4530009/ (дата обращения: 06.11.2025).
7. Захаренко С.М. Клиническое течение, микрофлора толстой кишки и коррекция дисбиоза у больных острой дизентерией Флекснера 2А : автореф. дис. … канд. мед. наук. СПб, 1997.
8. Требования, предъявляемые к питательным средам. URL: https://studfile.net/preview/5753177/page:2/ (дата обращения: 06.11.2025).
9. Таблица по биологии «Сравнительная характеристика прокариот и эукариот»: методические материалы на Инфоурок. URL: https://infourok.ru/tablica-po-biologii-sravnitelnaya-harakteristika-prokariot-i-eukariot-5290928.html (дата обращения: 06.11.2025).
10. Факторы естественной резистентности — Спортивная медицина. URL: https://www.sportivmed.ru/articles/faktor_est_rezist.html (дата обращения: 06.11.2025).
11. О Методических рекомендациях по классификации питательных сред для медицинской микробиологии (лабораторная диагностика in vitro) в целях регистрации изделий медицинского назначения. URL: https://www.rozdravnadzor.gov.ru/medproducts/info/756 (дата обращения: 06.11.2025).
12. Классификация питательных сред. URL: https://gigabaza.ru/doc/81615.html (дата обращения: 06.11.2025).
13. Питательные среды в микробиологии | Статья Prime Chemicals Group. URL: https://primechemicals.ru/blog/pitanye-sredy/ (дата обращения: 06.11.2025).
14. Государственное бюджетное образовательное учреждение — Электронный архив УГМУ. URL: https://elib.usma.ru/bitstream/usma/385/1/UCH_2015_010.pdf (дата обращения: 06.11.2025).
15. Шигеллез неуточненный (A03.9) — Клинические протоколы. URL: https://diseases.medelement.com/disease/%D1%88%D0%B8%D0%B3%D0%B5%D0%BB%D0%BB%D0%B5%D0%B7-%D0%BD%D0%B5%D1%83%D1%82%D0%BE%D1%87%D0%BD%D0%B5%D0%BD%D0%BD%D1%8B%D0%B9-a03-9/14582 (дата обращения: 06.11.2025).
16. Питательные среды: назначение, классификация, приготовление — Высокий город. URL: https://h-grad.ru/info/pitnye-sredy-naznachenie-klassifikaciya-prigotovlenie/ (дата обращения: 06.11.2025).
17. Шигеллез (дизентерия) | Compendium — справочник лекарственных препаратов. URL: https://compendium.com.ua/diseases/shigellez-dizenteriya/ (дата обращения: 06.11.2025).
18. Питательная среда — Википедия. URL: https://ru.wikipedia.org/wiki/%D0%9F%D0%B8%D1%82%D0%B0%D1%82%D0%B5%D0%BB%D1%8C%D0%BD%D0%B0%D1%8F_%D1%81%D1%80%D0%B5%D0%B4%D0%B0 (дата обращения: 06.11.2025).
19. Классификация питательных сред в микробиологии: виды, состав и назначение. URL: https://primechemicals.ru/blog/klassifikaciya-pitanyh-sred/ (дата обращения: 06.11.2025).
20. Естественная резистентность организма животных и человека: история вопроса. URL: https://cyberleninka.ru/article/n/estestvennaya-rezistentnost-organizma-zhivotnyh-i-cheloveka-istoriya-voprosa (дата обращения: 06.11.2025).
21. Питательная среда | справочник Пестициды.ru. URL: https://www.pesticidy.ru/dictionary/nutrient_medium (дата обращения: 06.11.2025).
22. Резистентность (биология) — Википедия. URL: https://ru.wikipedia.org/wiki/%D0%A0%D0%B5%D0%B7%D0%B8%D1%81%D1%82%D0%B5%D0%BD%D1%82%D0%BD%D0%BE%D1%81%D1%82%D1%8C_(%D0%B1%D0%B8%D0%BE%D0%BB%D0%BE%D0%B3%D0%B8%D1%8F) (дата обращения: 06.11.2025).
23. Заполните таблицу “Сравнение клеток прокариот и эукариот ” — Образовака. URL: https://obrazovaka.ru/biologiya/zapolnite-tablicu-sravnenie-kletok-prokariot-i-eukariot.html (дата обращения: 06.11.2025).
24. Шигеллез — CMD. URL: https://www.cmd-online.ru/meditsinskie-stati/shigellez/ (дата обращения: 06.11.2025).
25. ПРИГОТОВЛЕНИЕ ПИТАТЕЛЬНЫХ СРЕД И КУЛЬТИВИРОВАНИЕ МИКРООРГАНИЗМОВ — Томский политехнический университет. URL: https://es.edu.ru/pluginfile.php/65948/mod_resource/content/1/418706.pdf (дата обращения: 06.11.2025).
26. Дизентерия: симптомы, возбудитель, профилактика и причины шигеллеза | Privivka.ru. URL: https://privivka.ru/dizenteriya/ (дата обращения: 06.11.2025).
27. Патогенность и вирулентность микроорганизмов. Единицы измерения вирулентности микробов. URL: https://microbak.ru/mikrobiologiya/patogennost-i-virulentnost-mikroorganizmov-edinicy-izmereniya-virulentnosti-mikrobov.html (дата обращения: 06.11.2025).
28. Устойчивость шигеля во внешней среде, факторы и пути передачи, профилактика. URL: https://studfile.net/preview/3074558/page:51/ (дата обращения: 06.11.2025).
29. Вирулентность. Что такое вирулентность? Критерии вирулентности. Летальная доза ( DL, LD ). Инфицирующая доза ( ID ). — МедУнивер. URL: https://meduniver.com/Medical/Microbiology/virulentnost.html (дата обращения: 06.11.2025).
30. Прокариоты и эукариоты: строение и различия клеток — Skysmart. URL: https://skysmart.ru/articles/biologiya/prokarioty-i-eukarioty (дата обращения: 06.11.2025).
31. ДИЗЕНТЕРИЯ — Белорусский государственный медицинский университет. URL: https://www.bsmu.by/files/kaz-kafedra/infekcionnye-bolezni/2015/dizenteriya.pdf (дата обращения: 06.11.2025).
32. Shigella dysenteriae — Википедия. URL: https://ru.wikipedia.org/wiki/Shigella_dysenteriae (дата обращения: 06.11.2025).
33. ШИГЕЛЛЕЗ — CORE. URL: https://core.ac.uk/download/pdf/196884042.pdf (дата обращения: 06.11.2025).
34. Shigella (шигеллы, род бактерий) — Функциональная гастроэнтерология. URL: https://www.gastroscan.ru/handbook/118/8863/ (дата обращения: 06.11.2025).
35. Диагностика дизентерии (шигелла Зонне) | Каталог анализов медицинской лаборатории ЭндоМедЛаб (г. Москва, м. Дмитровское, м. Борисово). URL: https://www.endomedlab.ru/analiz/dizenteriya-shigella-zonne/ (дата обращения: 06.11.2025).
36. Эпи: Понятие о естественной резистентности организма. URL: https://epid.com.ua/ponyatie-o-estestvennoy-rezistentnosti-organizma/ (дата обращения: 06.11.2025).
37. Шигеллёз — Википедия. URL: https://ru.wikipedia.org/wiki/%D0%A8%D0%B8%D0%B3%D0%B5%D0%BB%D0%BB%D1%91%D0%B7 (дата обращения: 06.11.2025).
38. Шигеллёз — симптомы острой и хронической форм, стадии и признаки у мужчин и женщин, причины появления, диагностика и лечение заболевания — Инвитро. URL: https://www.invitro.ru/library/bolezni/32688/ (дата обращения: 06.11.2025).
39. Неспецифическая защита организма. URL: https://meduniver.com/Medical/Microbiology/nespecificheskaia_zashita_organizma.html (дата обращения: 06.11.2025).
40. Конституциональные факторы резистентности организма. Механические барьеры защиты организма. Некоторые конституциональные защитные барьеры. — МедУнивер. URL: https://meduniver.com/Medical/Microbiology/faktory_nespecificheskoi_rezistentnosti.html (дата обращения: 06.11.2025).
41. ШИГЕЛЛЕЗЫ У ВЗРОСЛЫХ. URL: https://www.ismu.baikal.ru/src/pdf/2021/Shigel_adults.pdf (дата обращения: 06.11.2025).
42. Дизентерия диагностика, лечение, анализы в СЗЦДМ. URL: https://xn—-btbhljaavv3c.xn--p1ai/dizenteriya-diagnostika-lechenie-analizy/ (дата обращения: 06.11.2025).
43. Вирулентность — Википедия. URL: https://ru.wikipedia.org/wiki/%D0%92%D0%B8%D1%80%D1%83%D0%BB%D0%B5%D0%BD%D1%82%D0%BD%D0%BE%D1%81%D1%82%D1%8C (дата обращения: 06.11.2025).
44. Сравнительная характеристика прокариот и эукариот | Таблица — 4ЕГЭ. URL: https://4ege.ru/biologiya/68903-sravnitelnaya-harakteristika-prokariot-i-eukariot.html (дата обращения: 06.11.2025).
45. Допустимые уровни бактериальной обсемененности воздушной среды помещений лечебных учреждений в зависимости от их функционального назначения и класса чистоты. URL: https://files.stroyinf.ru/Data2/1/4293817/4293817758.htm (дата обращения: 06.11.2025).
46. Приложение N 7. Допустимые уровни бактериальной обсемененности воздушной среды помещений лечебных учреждений в зависимости от их функционального назначения и класса чистоты — КонсультантПлюс. URL: https://www.consultant.ru/document/cons_doc_LAW_42959_doc_law_N_2_P_14/7c08a946f041d8e13ff8345c256089d53f86e737/#dst100028 (дата обращения: 06.11.2025).
47. Санитарно-микробиологическое исследование воздуха. URL: https://promterra.ru/articles/sanitarno-mikrobiologicheskoe-issledovanie-vozduha/ (дата обращения: 06.11.2025).
48. Микробиологический контроль воздуха — методы санитарно-бактериологического исследования атмосферы — Апекслаб. URL: https://apexlab.ru/mikrobiologicheskiy-kontrol-vozduha/ (дата обращения: 06.11.2025).
49. МУК 4.2.2942-11 Методы санитарно-бактериологических исследований объектов окружающей среды, воздуха и контроля стерильности в лечебных организациях — docs.cntd.ru. URL: https://docs.cntd.ru/document/1200088927 (дата обращения: 06.11.2025).
50. МИКРОБИОЛОГИЧЕСКОЕ ИССЛЕДОВАНИЕ ВОЗДУШНОЙ СРЕДЫ МНОГОПРОФИЛЬНОГО СТАЦИОНАРА. URL: https://science-education.ru/ru/article/view?id=32014 (дата обращения: 06.11.2025).
51. Гигиеническая оценка микробного загрязнения воздуха помещений лпо. URL: https://elib.spsmu.ru/download/bakteriologicheskaya-bezopasnost-kroviprev.pdf (дата обращения: 06.11.2025).
52. Лекция. Санитарно-микробиологическое исследование воздуха -1 апреля. URL: https://studfile.net/preview/9595221/ (дата обращения: 06.11.2025).
53. Приложение 1. Допустимые уровни бактериальной обсемененности воздуха в операционных — Документы системы ГАРАНТ. URL: https://www.garant.ru/products/ipo/prime/doc/70002047/ (дата обращения: 06.11.2025).