Генетический полиморфизм Толл-подобных рецепторов (TLRs): от молекулярных основ до клинического значения

В грандиозном театре человеческого организма, где каждый день разворачиваются тысячи молекулярных драм, главные роли в защите от внешних угроз играют Толл-подобные рецепторы (TLRs). Эти молекулярные стражи являются краеугольным камнем врожденного иммунитета, первой линии обороны, способной мгновенно распознавать чужеродные агенты и запускать каскад защитных реакций. Однако эффективность этого иммунного ответа не является абсолютной константой; она подвержена тонким, но порой критическим вариациям, заложенным в нашем генетическом коде. Именно здесь на сцену выходит концепция генетического полиморфизма – изменчивости, которая, как невидимый дирижер, модулирует силу и специфичность иммунного ответа.

Актуальность изучения генетического полиморфизма TLRs трудно переоценить. В условиях постоянно меняющейся эпидемиологической обстановки, появления новых патогенов и распространения резистентных форм, понимание того, как индивидуальные генетические особенности влияют на способность организма противостоять угрозам, становится критически важным. От восприимчивости к тяжелым инфекциям, таким как COVID-19 или внебольничная пневмония, до предрасположенности к аутоиммунным заболеваниям, онкологии и сердечно-сосудистым патологиям – везде прослеживается тень генетических вариаций в генах TLRs.

Данная курсовая работа ставит своей целью не просто сбор, а всестороннее и глубокое осмысление информации о генетическом полиморфизме Толл-подобных рецепторов. Мы начнем с фундаментальных молекулярно-биологических аспектов функционирования TLRs, погрузимся в мир генетической изменчивости, исследуем конкретные, наиболее изученные полиморфизмы и их функциональные последствия. Далее будет проведен анализ популяционного распределения этих вариаций, неразрывно связанного с эволюционными процессами, и, наконец, систематизировано их клиническое значение в патогенезе широкого спектра заболеваний. Завершит работу обзор современных методов, позволяющих раскрывать эти генетические тайны, открывая путь к персонализированной медицине и новым терапевтическим стратегиям.

Толл-подобные рецепторы (TLRs): Общая характеристика и молекулярные механизмы действия

Толл-подобные рецепторы (TLRs) — это не просто белковые структуры; это сенсоры, разработанные эволюцией для обнаружения признаков опасности, и именно гены, кодирующие эти рецепторы, являются центральными в формировании первой линии защиты организма. Они представляют собой один из важнейших классов паттерн-распознающих рецепторов (PRRs), играющих ключевую роль в распознавании компонентов микробов (патоген-ассоциированных молекулярных паттернов, PAMPs) и поврежденных клеток (дамп-ассоциированных молекулярных паттернов, DAMPs) клетками врожденного иммунитета.

Классификация и структура TLRs у человека

У человека охарактеризовано не менее 10 функциональных Toll-подобных рецепторов, известных как TLR1-TLR10. Однако, в целом у млекопитающих и человека идентифицировано до 15 TLR, включая те, что расположены на мембране, в эндосомах или в цитоплазме клеток. Каждый из этих рецепторов представляет собой трансмембранный белок с внеклеточным доменом, содержащим лейцин-богатые повторы (LRRs) для связывания лигандов, и внутриклеточным TIR-доменом (Toll/IL-1 рецептор), необходимым для инициации сигнальных каскадов.

Эти рецепторы можно условно разделить на две группы по их локализации:

• Мембранные TLRs: Расположены на поверхности клеток, таких как макрофаги, дендритные клетки, нейтрофилы, и распознают PAMPs, находящиеся вне клетки. К ним относятся TLR1, TLR2, TLR4, TLR5, TLR6, TLR10.
• Эндосомальные TLRs: Находятся внутри клеток, в мембранах эндосом и лизосом, и специализируются на распознавании нуклеиновых кислот патогенов, которые попадают в клетку путем эндоцитоза. Это TLR3, TLR7, TLR8, TLR9.

Специфика лигандов и механизмы распознавания

Поистине удивительна избирательность TLRs, каждый из которых настроен на распознавание определенной молекулярной структуры, уникальной для патогена или сигнала опасности. Эта специфичность позволяет иммунной системе точно определить тип угрозы и запустить соответствующий ответ.

Рассмотрим несколько примеров:

• TLR2: Этот рецептор уникален своей способностью формировать гетеродимеры и распознает пептидогликаны – ключевой компонент клеточной стенки грамположительных бактерий.
• TLR3: Специализируется на обнаружении двухцепочечной вирусной РНК (дцРНК), которая является маркером вирусной репликации и инициирует иммунный ответ при различных вирусных заболеваниях.
• TLR4: Широко известен как рецептор для липополисахарида (ЛПС) – эндотоксина грамотрицательных бактерий, который является одним из самых мощных стимуляторов врожденного иммунитета. Его активация вызывает сильное воспаление.
• TLR5: Распознает флагеллин – белок, формирующий жгутики у многих бактерий, что позволяет им двигаться.
• TLR7, TLR8, TLR9: Эти рецепторы погружены во внутриклеточные компартменты и ответственны за распознавание нуклеиновых кислот. TLR9, например, специфически связывается с неметилированными парами динуклеотидов цитозин/гуанин (CpG), характерными для бактериальной и вирусной ДНК, а также со структурами капсида и генома вирусных агентов, действуя совместно с TLR7 и TLR8. TLR7 и TLR8, в свою очередь, активируются одноцепочечной вирусной РНК.

Сигнальные пути TLRs и их адаптерные белки

Когда лиганд связывается с TLR, происходит конформационное изменение, которое приводит к димеризации рецептора и рекрутированию адаптерных белков к его внутриклеточному TIR-домену. Этот шаг является критическим для запуска сигнального каскада, который в конечном итоге активирует транскрипционные факторы и приводит к экспрессии генов, кодирующих важные иммунные медиаторы.

Самый известный адаптерный белок – MyD88, который участвует в сигнализации большинства TLRs. Однако существуют и другие пути. Например, при связывании дцРНК с TLR3 он димеризуется и рекрутирует адаптерный белок TRIF (адаптерный белок, содержащий домен TIR, индуцирующий интерферон-β). Активация этих каскадов приводит к продукции:

• Интерферонов (особенно интерферон-α/β): Ключевые противовирусные субстанции.
• Провоспалительных цитокинов: Таких как интерлейкин-1β (ИЛ-1β), интерлейкин-6 (ИЛ-6), фактор некроза опухоли-альфа (ФНО-α), которые координируют воспалительный ответ и привлекают другие иммунные клетки.
• Хемокинов: Например, интерлейкина-8 (ИЛ-8) и моноцитарного хемоаттрактантного протеина-1 (МСР-1), которые направляют миграцию иммунных клеток к очагу инфекции.
• Других белковых структур: Обладающих противовирусными свойствами, включая продукты индуцибельной синтазы оксида азота (iNOS), такие как оксид азота и пероксинитрит, оказывающие цитотоксическое действие на опухолевые и инфицированные клетки.

В Таблице 1 представлен обобщенный список основных TLRs, их лигандов и ключевых индуцируемых медиаторов.

Таблица 1: Классификация TLRs, их лиганды и основные эффекторы

TLR	Локализация	Основные лиганды	Ключевые эффекторы
TLR1	Мембранный	Триацилированные липопептиды (в гетеродимере с TLR2)	Провоспалительные цитокины, хемокины
TLR2	Мембранный	Пептидогликаны, липопротеины, липотейхоевая кислота	Провоспалительные цитокины, хемокины
TLR3	Эндосомальный	Двухцепочечная вирусная РНК (дцРНК)	Интерфероны (ИФН-α/β), провоспалительные цитокины, хемокины
TLR4	Мембранный	Липополисахарид (ЛПС) грамотрицательных бактерий	Провоспалительные цитокины (ИЛ-1β, ИЛ-6, ФНО-α), хемокины (ИЛ-8, МСР-1), iNOS
TLR5	Мембранный	Флагеллин бактерий	Провоспалительные цитокины, хемокины
TLR6	Мембранный	Диацилированные липопептиды (в гетеродимере с TLR2)	Провоспалительные цитокины, хемокины
TLR7	Эндосомальный	Одноцепочечная вирусная РНК (оцРНК)	Интерфероны (ИФН-α/β), провоспалительные цитокины
TLR8	Эндосомальный	Одноцепочечная вирусная РНК (оцРНК)	Интерфероны (ИФН-α/β), провоспалительные цитокины
TLR9	Эндосомальный	Неметилированные CpG ДНК, вирусная ДНК	Интерфероны (ИФН-α/β), провоспалительные цитокины
TLR10	Мембранный/Эндосомальный	Не до конца изучены, возможно, антивоспалительная роль	Антивоспалительные цитокины (предположительно)

Гетеродимеризация TLRs: роль TLR1, TLR2, TLR6

Особого внимания заслуживает TLR2, который является своеобразным «командиром» в формировании гетеродимеров, расширяя спектр распознаваемых лигандов. В отличие от других TLRs, которые могут функционировать как гомодимеры, гомодимеры TLR1, TLR2 и TLR6 сами по себе функционально неактивны. Их активация происходит только при образовании специфических гетеродимеров:

• Гетеродимер TLR2-TLR6: Этот комплекс формируется на поверхности цитоплазматической мембраны и эффективно распознает диацилированные липопептиды, характерные для грамположительных бактерий и микоплазм.
• Гетеродимер TLR2-TLR1: Также расположен на клеточной мембране, но специализируется на триацилированных липопептидах, встречающихся у грамотрицательных бактерий и микоплазм.

Таким образом, посредством гетеродимеризации TLR2 позволяет иммунной системе различать тонкие химические особенности липопептидов, что обеспечивает более точный и адаптированный ответ на различные микробные угрозы. Это демонстрирует сложную и многоуровневую природу распознавания патогенов во врожденном иммунитете. Тем не менее, как мы увидим далее, даже такие тонкие механизмы могут быть изменены из-за генетического полиморфизма.

Генетический полиморфизм: Виды, масштабы и влияние на функцию TLRs

Генетический полиморфизм — это не просто случайные отличия, а фундаментальный аспект биологического разнообразия, который лежит в основе эволюции и индивидуальных различий в реакциях организма. Он представляет собой состояние длительного разнообразия генотипов, когда частота даже наиболее редко встречающихся генотипов в популяциях превышает 1%. Это не случайные мутации, которые быстро исчезают, а устойчивые варианты, которые поддерживаются в популяции из поколения в поколение.

Определение и механизмы поддержания генетического полиморфизма

По своей сути, генетический полиморфизм, или генетическое разнообразие, — это наличие разных вариаций генов. Само слово происходит от греческих «poly» (много) и «morpho» (форма), что идеально отражает его сущность. В популяции одновременно существуют несколько аллельных вариантов какого-либо гена, находящихся в динамическом равновесии в течение многих поколений. Аллель считается полиморфным, если его частота в популяции превышает 1%.

Каким образом поддерживается это разнообразие? В первую очередь, за счет мутаций — случайных изменений в последовательности ДНК, которые могут создавать новые аллели. Во-вторых, рекомбинации генетического материала в процессе мейоза перетасовывают существующие аллели, создавая новые комбинации и поддерживая разнообразие. Естественный отбор, миграции и генетический дрейф также играют значительную роль в формировании и поддержании полиморфизма, определяя, какие варианты будут закрепляться в популяции.

Основные типы генетических полиморфизмов в генах TLRs

Генетический полиморфизм проявляется в различных формах, каждая из которых имеет свои особенности и потенциальное влияние на функцию гена или белка. Наиболее распространены следующие типы:

• Однонуклеотидный полиморфизм (SNP, Single Nucleotide Polymorphism): Это самый частый тип полиморфизма, представляющий собой замену одного нуклеотида на другой в определенной позиции ДНК. Масштабы генетического полиморфизма у человека поразительны: между последовательностями ДНК двух произвольно взятых людей (за исключением однояйцевых близнецов) существуют миллионы различий. В среднем, ДНК двух произвольно взятых людей отличается примерно в 3 миллионах нуклеотидов, что составляет около 0,1% от общего количества нуклеотидов в геноме человека. Эти SNP могут располагаться как в кодирующих, так и в некодирующих областях генома.
• Инсерции/делеции (InDels): Это вставки или выпадения одного или нескольких нуклеотидов в последовательности ДНК. Они могут быть небольшими (несколько нуклеотидов) или крупными (до нескольких тысяч). Если InDels происходят в кодирующей области, они могут вызвать сдвиг рамки считывания, что приведет к синтезу полностью измененного или укороченного белка.
• Вариации числа копий (CNV, Copy Number Variation): Это изменения в количестве копий относительно больших фрагментов ДНК (от тысяч до миллионов пар нуклеотидов). Эти фрагменты могут содержать один или несколько генов. CNV могут влиять на дозу гена и, как следствие, на количество синтезируемого белка.
• Повторяющиеся фрагменты ДНК: К ним относятся микросателлиты (короткие тандемные повторы, STR) и минисателлиты (вариабельные тандемные повторы, VNTR). Изменения числа этих повторов являются высокополиморфными и часто используются в генетическом картировании и судебной медицине.

В контексте генов TLRs, наиболее изучены именно SNP, поскольку они часто являются причиной функциональных изменений рецепторов.

Функциональное значение полиморфизмов: «молчащие» и патогенные варианты

Далеко не каждый генетический полиморфизм приводит к изменению функции белка или фенотипа. Большинство генетических полиморфизмов являются так называемыми «молчащими» или синонимичными заменами. Они не влияют на экспрессию генов, структуру и функцию белковой молекулы. Например, SNP в некодирующих областях (интронах) или синонимичные замены в кодирующих областях (когда замена нуклеотида не меняет аминокислоту в белке) могут быть абсолютно нейтральными.

Однако существуют и «патогенные» полиморфизмы, которые изменяют экспрессию гена или функцию белка. Именно такие варианты представляют наибольший интерес для медицинской генетики и иммунологии. Полиморфизм кодирующих TLR генов может влиять на аминокислотную структуру рецепторов, что, в свою очередь, сказывается на их трехмерной конфигурации, способности связывать лиганды (лигандсвязывающая функция) и взаимодействовать с другими белками (корецепторная функция). Эти изменения могут способствовать нарушению определенных ключевых сигнальных путей, что приводит к измененному, часто неоптимальному, иммунному ответу.

Например, полиморфизм в области, отвечающей за связывание лиганда, может снизить аффинность рецептора к патогену, делая организм более восприимчивым к инфекции. Или же, изменение в TIR-домене может нарушить взаимодействие с адаптерными белками, блокируя или ослабляя запуск сигнального каскада. Понимание этих тонких механизмов является ключом к расшифровке индивидуальных различий в иммунном ответе и предрасположенности к заболеваниям.

Изученные полиморфизмы генов TLRs: Конкретные примеры и их функциональные последствия

Исследования генетического полиморфизма Толл-подобных рецепторов раскрывают удивительные детали того, как мельчайшие изменения в нашем ДНК могут драматически влиять на фундаментальные процессы иммунитета. Каждый из рассмотренных ниже полиморфизмов – это не просто набор букв, а ключ к пониманию индивидуальных различий в восприимчивости к заболеваниям.

Полиморфизмы TLR1

Ген TLR1 является частью кластера генов TLR10/TLR1/TLR6, расположенного на одной хромосоме. Этот комплекс генов считается «горячей точкой» эволюции и подвержен интенсивному естественному отбору, что указывает на его критическую роль в иммунной системе.

Одним из наиболее изученных полиморфизмов в гене TLR1 является rs5743551. Этот полиморфизм связан с повышенным риском развития острого нарушения мозгового кровообращения у пациентов с ишемической болезнью сердца в возрасте старше 55 лет. Гетерозиготный генотип (C/T) по данному полиморфизму, по-видимому, изменяет иммунный ответ, который играет роль в патогенезе атеросклероза и связанных с ним тромботических событий. Хотя точный молекулярный механизм этого влияния еще изучается, предполагается, что изменение функции TLR1 может приводить к хроническому воспалению или нарушению регуляции иммунных клеток, участвующих в формировании атеросклеротических бляшек.

Полиморфизмы TLR2

Ген TLR2 занимает центральное место в распознавании компонентов грамположительных бактерий, микоплазм и некоторых грибов. Его полиморфизмы имеют значительное клиническое значение.

Наиболее охарактеризованной миссенс-мутацией в кодирующей области гена TLR2 является вариант Arg753Gln (rs574308). Этот полиморфизм представляет собой замену аргинина (Arg) на глутамин (Gln) в позиции 753 аминокислотной последовательности белка, которая находится во внутриклеточном TIR-домене. TIR-домен критически важен для передачи сигналов внутрь клетки. Функционально значимая замена Arg753Gln ведет к измененной передаче сигналов, что может проявляться как в сниженном, так и в гиперактивном воспалительном ответе. Носительство аллеля Gln ассоциировано с повышенным риском развития синдрома старческой астении, при котором шанс развития этого синдрома у пациентов с генотипом Arg/Gln в 12,8 раз выше. Более того, у таких пациентов экспрессия гена TLR2 была в 1,3 раза выше, чем у лиц с генотипом Arg/Arg, что указывает на комплексное влияние этого полиморфизма на клеточные процессы.

Другой важный полиморфизм – rs5743708 гена TLR2. Носительство аллеля A по этому полиморфизму предрасполагало к развитию тяжелой внебольничной пневмонии (отношение шансов (ОШ) = 2,77; p = 0,021) у европеоидов. Это подчеркивает, как генетическая изменчивость может модулировать восприимчивость к распространенным инфекционным заболеваниям.

Полиморфизмы TLR3

TLR3 играет ключевую роль в противовирусном иммунитете, распознавая двухцепочечную РНК. Его полиморфизмы могут влиять на эффективность ответа на вирусные инфекции.

Полиморфизм L412F (rs3775291) гена TLR3 был определен как функциональный полиморфизм у пациентов с подтвержденной SARS-CoV-2 инфекцией в итальянской популяции. Эта замена аминокислоты может влиять на способность TLR3 связывать вирусную дцРНК или на эффективность активации сигнального пути через адаптерный белок TRIF, что, в свою очередь, может влиять на продукцию интерферонов и тяжесть течения COVID-19.

Полиморфизмы TLR4

TLR4 является центральным рецептором для липополисахарида (ЛПС) грамотрицательных бактерий и одним из наиболее интенсивно изучаемых TLR в контексте полиморфизмов.

Наиболее известные полиморфизмы гена TLR4 — это Asp299Gly (rs4986790) и Thr399Ile (rs4986791). Они часто рассматриваются в паре, поскольку их локусы расположены близко друг к другу.

• Asp299Gly (rs4986790): Представляет собой замену аспартата (Asp) на глицин (Gly) в позиции 299 белка.
• Thr399Ile (rs4986791): Является нуклеотидной заменой цитозина (C) тимином (T) в позиции 1196 гена TLR4, что приводит к замене треонина (Thr) изолейцином (Ile) в позиции 399 аминокислотной последовательности белка.

Оба полиморфизма расположены во внеклеточном домене TLR4, который отвечает за связывание лигандов. Эти замены аминокислот приводят к изменению конфигурации рецептора и нарушению его функции, в частности, способности к распознаванию и лигированию ЛПС. Это может проявляться в снижении или изменении передачи сигналов, что влияет на продукцию провоспалительных цитокинов. Например, аллель G полиморфизма Asp299Gly гена TLR4 был ассоциирован с более низким риском развития острых коронарных событий в китайской популяции. Однако, в других исследованиях, для этого же полиморфизма было отмечено отсутствие ассоциаций с риском атеросклероза, инфаркта миокарда и инсульта, что указывает на популяционную специфичность и сложность интерпретации.

Полиморфизмы TLR6

TLR6 также участвует в распознавании липопептидов грамположительных бактерий, образуя гетеродимер с TLR2.

Полиморфизм rs3775073 гена TLR6 показал статистически значимую ассоциацию со сниженным риском развития инфекционного эндокардита (ОШ = 0,51, 95% ДИ = 0,26–0,97; p = 0,032) в соответствии с рецессивной моделью наследования (генотип C/C). Инфекционный эндокардит (ИЭ) имеет бактериальную этиологию, и снижение риска при определенном генотипе TLR6 предполагает, что этот вариант рецептора может способствовать более эффективному иммунному ответу или, наоборот, снижать гипервоспаление, которое может способствовать повреждению тканей.

Эти примеры ярко демонстрируют, что полиморфизмы в генах TLRs не являются нейтральными: они могут влиять на структуру белка, его функцию и, как следствие, на способность организма эффективно реагировать на широкий спектр патогенных угроз и воспалительных стимулов, формируя индивидуальный профиль риска для различных заболеваний.

Популяционное распределение полиморфизмов TLRs и эволюционные факторы его формирования

Генетический ландшафт человечества представляет собой мозаику, сформированную тысячелетиями миграций, адаптации к различным условиям окружающей среды и, конечно же, постоянной борьбой с патогенами. Полиморфизмы Толл-подобных рецепторов не являются исключением из этого правила; их частоты и комбинации существенно различаются в разных этнических и географических популяциях, что отражает сложную историю взаимодействия между иммунитетом и факторами внешней среды.

Вариабельность частот аллелей и генотипов в мировых популяциях

Изучение генетических вариаций TLRs в различных популяциях мира выявило значительные различия в частотах аллелей и генотипов. Эти различия могут приводить к разной восприимчивости к инфекционным заболеваниям и другим патологиям.

Например, генетические полиморфизмы генов подсемейства TLR2 (включая TLR1, TLR6, TLR10) встречаются с разной частотой в различных человеческих популяциях. Возьмем полиморфизм Asp299Gly гена TLR4. В популяции Крыма распределение частот генотипов в контрольной группе составляло:

• AA: 85%
• AG: 14%
• GG: 1%

При этом, в группе пациентов с атопической бронхиальной астмой эти частоты существенно отличались (χ² = 6,598, p = 0,037), составляя:

• AA: 76%
• AG: 22%
• GG: 2%

Эти данные демонстрируют, как даже в пределах одной географической территории различия в частотах генотипов могут быть связаны с предрасположенностью к заболеваниям.

Более глобально, различия в генетических вариациях TLRs между этническими группами, такими как европеоидные и монголоидные популяции, могут приводить к разной восприимчивости к инфекционным заболеваниям. Например, к внебольничной пневмонии, что отражает адаптацию популяций к местным условиям и характерным для них патогенам. Понимание этих нюансов критически важно для разработки популяционно-специфических подходов в медицине.

Влияние естественного отбора на гены TLRs

Естественный отбор — это краеугольный камень эволюции, основной движущий фактор, который способствует увеличению числа особей, обладающих более высокой приспособленностью к условиям среды. В процессе естественного отбора закрепляются мутации, которые увеличивают выживаемость и репродуктивный успех организмов. Это происходит потому, что организмы производят потомков больше, чем может выжить, в популяции существует наследственная изменчивость, и особи с более благоприятными генетическими чертами имеют лучшую выживаемость и способность размножаться.

Гены кластера TLR10–TLR1–TLR6 представляют собой яркий пример «горячей точки» эволюции и несут следы положительного естественного отбора. Это означает, что варианты этих генов, которые давали преимущество в борьбе с патогенами в определенной среде, активно закреплялись в популяции, увеличивая свою частоту. Длительная коэволюция человека и патогенов привела к тому, что иммунные гены, такие как TLRs, постоянно находятся под давлением отбора. Полиморфизмы, которые обеспечивали лучшую защиту от эндемичных инфекций, получали преимущество и распространялись.

Другие факторы формирования популяционного распределения

Помимо естественного отбора, на популяционное распределение полиморфизмов TLRs влияют и другие факторы:

• Миграции: Массовые перемещения населения на протяжении истории человечества приводили к смешению генетических пулов и распространению аллелей между континентами.
• Генетический дрейф: Случайные колебания частот аллелей, особенно в малых популяциях, могут также значительно изменять их распределение независимо от их адаптивной ценности.
• Адаптация к специфическим патогенам: Постоянное взаимодействие с местными патогенами формирует уникальный профиль полиморфизмов. Например, популяции, долгое время находившиеся под давлением определенных бактерий или вирусов, могут иметь высокую частоту аллелей TLRs, которые обеспечивают лучшую защиту от этих конкретных возбудителей.

Яркой иллюстрацией адаптации и популяционного распределения являются данные, полученные в контексте пандемии COVID-19:

• В египетской популяции минорные аллели TLR4 299Gly (G) и TLR4 399Ile (T) были связаны с тяжестью течения COVID-19.
• Аналогичные результаты получены мексиканскими исследователями, показавшими, что генотип TLR4 GG (rs4986790) также связан с тяжестью COVID-19.
• В русской популяции Челябинской области выявлено, что генотип GG полиморфизма 1805T>G гена TLR1 статистически значимо чаще встречался в контрольной группе по сравнению с группами умеренной и тяжелой двусторонней пневмонии при COVID-19. Этот генотип был оценен как протекторный, то есть защищающий от тяжелого течения болезни.

Эти примеры подчеркивают, что генетическое разнообразие TLRs является динамичным отражением сложной истории взаимодействия человека со средой и патогенами, формируя уникальные иммунные профили в разных уголках мира. Не является ли это прямым доказательством того, что адаптация к локальным условиям сыграла ключевую роль в формировании нашего индивидуального иммунного «отпечатка»?

Клиническое значение полиморфизмов генов TLRs в патогенезе заболеваний

Генетические полиморфизмы Толл-подобных рецепторов (TLRs) выходят далеко за рамки академического интереса, оказывая глубокое влияние на клиническую картину многих заболеваний. Доказано, что возникновение однонуклеотидных полиморфизмов (SNP) в генах TLRs приводит к нарушению функционирования некоторых ключевых сигнальных путей, что в конечном итоге повышает риск развития широкого спектра патологий: инфекционных, аутоиммунных, онкологических и сердечно-сосудистых. Идентификация этих полиморфизмов может значительно расширить наше понимание патогенеза различных состояний, открывая новые горизонты для диагностики и терапии.

Полиморфизмы TLRs и восприимчивость к инфекционным заболеваниям

Изменения, влекущие сниженную или повышенную экспрессию генов, кодирующих Toll-рецепторы, а также сами полиморфизмы данных генов, могут обуславливать как сниженный, так и гипервоспалительный ответ на инфекцию. Эта генетическая гетерогенность частично объясняет широкий спектр клинических проявлений одной и той же инфекции в популяции.

• COVID-19:
  • TLR2 распознает поверхностные белки SARS-CoV-2 перед проникновением в клетку и активирует передачу воспалительных сигналов.
  • TLR4 опосредует устойчивое системное воспаление, которое часто наблюдается при тяжелых формах COVID-19.
  • TLR7 может являться наиболее важным геном восприимчивости к COVID-19. Он играет ключевую роль в системной активации иммунной системы, запуская мощный противовирусный ответ, в частности, через индукцию интерферонов. Определенные варианты TLR7 с потерей функции ассоциированы с увеличенной тяжестью течения COVID-19. Редкие формы гена TLR7 могут повышать риск развития тяжелой формы COVID-19 в 12 раз, что подчеркивает его критическую роль.
• Пневмония: Полиморфизмы TLR2 (rs5743708) и TLR4 (rs4986791) демонстрировали повышенный риск развития пневмонии (в 3,6 и 2,5 раза соответственно) и более тяжелого течения заболевания, что указывает на их значимость в прогнозировании исхода.
• Инфекционный эндокардит (ИЭ): Это заболевание бактериальной этиологии напрямую связано со скоростью и качеством иммунного реагирования. Гены рецепторов врожденного иммунитета могут являться кандидатными при определении рисков развития ИЭ. Полиморфизм гена TLR6 (rs3775073) статистически значимо ассоциирован со сниженным риском развития ИЭ (ОШ = 0,51, 95% ДИ = 0,26–0,97; p = 0,032). Также полиморфизм гена триггерного рецептора миелоидных клеток (TREM-1) rs1817537, контролирующего секрецию ряда провоспалительных цитокинов и хемокинов, связан со сниженным риском развития ИЭ.
• Острые кишечные инфекции (ОКИ): Однонуклеотидный полиморфизм Asp299Gly гена TLR4 может являться биомаркером предрасположенности к ОКИ и прогнозирования клинического течения инфекции. У пациентов с гомозиготным вариантом 299A/A гена TLR4 симптоматика острых кишечных инфекций проявлялась более ярко с выраженными лихорадочно-интоксикационным и диспепсическим синдромами.

Полиморфизмы TLRs в развитии аутоиммунных и воспалительных заболеваний

Нарушения в TLR-сигнальных путях, вызванные генетическими полиморфизмами, могут приводить к неадекватной активации иммунной системы, что лежит в основе развития аутоиммунных патологий.

• Саркоидоз легких: Полиморфизмы Asp299Gly (rs4986790) и Thr399Ile (rs4986791) гена TLR4 ассоциированы с развитием саркоидоза легких. Примечательно, что эти ассоциации различаются в разных популяциях (например, отсутствие связи у датчан, но наличие у греков и связь с хроническим течением у населения Германии), что еще раз подчеркивает этническую специфичность.
• Атопическая бронхиальная астма: Полиморфизм Asp299Gly гена TLR4 также связан с риском развития атопической бронхиальной астмы в популяции Крыма, что указывает на его роль в регуляции аллергических реакций и хронического воспаления в дыхательных путях.
• Синдром старческой астении: Носительство аллеля Gln полиморфизма Arg753Gln (rs574308) гена TLR2 статистически значимо ассоциировано с повышенным риском развития этого синдрома. У долгожителей с генотипом Arg/Gln шанс развития синдрома старческой астении в 12,8 раз выше, а экспрессия гена TLR2 была в 1,3 раза выше, чем в группе с генотипом Arg/Arg, что предполагает роль хронического низкоуровневого воспаления в патогенезе старения. Аллель Arg и генотип Arg/Arg являются протективными факторами.
• Ревматоидный артрит: Связь SNP с восприимчивостью к инфекционным и воспалительным заболеваниям желудочно-кишечного тракта, а также с ревматоидным артритом (например, TLR6 SNP 745С>Т), установлена клинически.
• Глаукома: Связь полиморфизма TLR генов, несмотря на доказанную значимость участия их белковых продуктов в патогенезе глаукомы, требует дополнительных исследований с учетом этнических особенностей пациентов и межгенных взаимодействий.

Роль полиморфизмов TLRs в онкогенезе

Значительное число работ посвящено выявлению ассоциаций SNP Toll-подобных рецепторов с возникновением злокачественных новообразований. TLRs могут влиять на развитие опухолей через регуляцию воспаления, клеточной пролиферации, апоптоза и метастазирования.

• Колоректальный рак: Микросателлитный GT-полиморфизм в гене TLR2 ассоциирован с колоректальным раком. Гетерозиготный генотип по полиморфизму TLR4_A896G с высокой степенью достоверности ассоциирован с повышенной вероятностью возникновения рака прямой кишки (ОШ = 1,82, 95% ДИ = 0,98–3,4, P = 0,0576).

Связь полиморфизмов TLRs с сердечно-сосудистыми заболеваниями

Хроническое воспаление играет ключевую роль в развитии атеросклероза и других сердечно-сосудистых заболеваний. TLRs, будучи регуляторами воспалительных процессов, также могут влиять на риск их возникновения.

• Острые коронарные события: Аллель G полиморфизма Asp299Gly гена TLR4 был ассоциирован с более низким риском развития острых коронарных событий в китайской популяции. Однако, как было отмечено ранее, в других исследованиях, для этого же полиморфизма было отмечено отсутствие ассоциаций с риском атеросклероза, инфаркта миокарда и инсульта, что подчеркивает необходимость дальнейших исследований и учета контекста.

Таким образом, генетический полиморфизм TLRs — это многогранный феномен, который служит важным звеном в сложной сети предрасположенности и устойчивости к различным заболеваниям. Его изучение открывает путь к пониманию индивидуальных особенностей иммунитета и персонализированным подходам в медицине.

Современные методы выявления и изучения генетических полиморфизмов TLRs

Изучение генетического полиморфизма Толл-подобных рецепторов (TLRs) требует применения высокоточных и чувствительных молекулярно-генетических методов. С развитием технологий эти методы становятся все более доступными и информативными, позволяя исследователям углубляться в тонкости генетической изменчивости и ее клинических последствий.

Методы на основе полимеразной цепной реакции (ПЦР)

Полимеразная цепная реакция (ПЦР) является краеугольным камнем молекулярной биологии и основой для большинства методов выявления генетических полиморфизмов. Ее преимущество заключается в способности амплифицировать (многократно копировать) специфические участки ДНК, что делает возможным анализ даже мельчайших образцов.

• Стандартная ПЦР с последующим рестрикционным анализом (ПЦР-ПДРФ, PCR-RFLP): Этот метод широко используется для определения полиморфизмов, которые изменяют сайты узнавания для специфических рестрикционных ферментов. После амплификации интересующего участка ДНК, полученные фрагменты обрабатывают рестриктазами. Если полиморфизм (например, SNP) создает или устраняет сайт узнавания для фермента, фрагменты ДНК будут разрезаны по-разному, что можно визуализировать с помощью электрофореза. Различные длины рестрикционных фрагментов (полиморфизм длин рестрикционных фрагментов) указывают на наличие конкретного аллеля.
• Аллель-специфичная ПЦР в реальном времени: Этот метод является более быстрым и высокопроизводительным. Он использует специфические праймеры, которые комплементарны только одному из аллельных вариантов полиморфизма. В реальном времени отслеживается накопление продукта ПЦР с помощью флуоресцентных красителей или зондов. Это позволяет не только определить наличие полиморфизма, но и количественно оценить частоту аллелей или генотипов в образце, что особенно полезно для генотипирования.

Методы секвенирования

Секвенирование ДНК является «золотым стандартом» для точного определения последовательностей нуклеотидов и выявления всех типов генетических полиморфизмов.

• Секвенирование по Сэнгеру: Хотя сейчас считается методом средней производительности, секвенирование по Сэнгеру по-прежнему используется для подтверждения результатов других методов или для анализа небольших, целевых участков ДНК. Оно предоставляет высококачественные данные о последовательности, позволяя однозначно идентифицировать SNP, инсерции/делеции и другие вариации.
• Высокопроизводительное секвенирование (Next-Generation Sequencing, NGS): Современные NGS-платформы произвели революцию в генетике, позволяя секвенировать целые геномы, экзомы или крупные панели генов за один прогон. Это незаменимо для комплексного анализа множественных полиморфизмов в генах TLRs, выявления редких вариантов и исследования их гаплотипов. NGS обеспечивает беспрецедентный объем данных, необходимый для выявления всех типов генетических вариаций, включая SNP, InDels, а также более крупные структурные перестройки.

Биоинформатические подходы

После получения огромного объема данных с помощью секвенирования, критически важными становятся биоинформатические инструменты.

• Анализ данных секвенирования: Биоинформатические программы используются для картирования коротких прочтений ДНК на референсный геном, выявления вариаций (SNP, InDels, CNV), фильтрации артефактов и аннотации функциональных последствий обнаруженных полиморфизмов.
• Прогнозирование функциональных последствий: Специализированные алгоритмы и базы данных позволяют предсказать, как конкретный полиморфизм может повлиять на структуру и функцию белка (например, изменить аминокислотную последовательность, нарушить сайты связывания, повлиять на стабильность мРНК). Это помогает ранжировать полиморфизмы по их потенциальной клинической значимости.
• Популяционная генетика: Биоинформатика также используется для анализа популяционного распределения аллелей и генотипов, оценки генетического дрейфа, потока генов и выявления следов естественного отбора.

Другие маркеры генетической вариабельности

Помимо SNP и InDels, существуют и другие маркеры, которые играют значительную роль в понимании генетической вариабельности и могут быть изучены с использованием вышеописанных методов:

• CNV (Copy Number Variation): Вариации числа копий определенных участков ДНК могут влиять на дозу гена и, как следствие, на уровень экспрессии белка TLR. Методы, такие как количественная ПЦР в реальном времени (qPCR) или специализированные алгоритмы анализа данных NGS, используются для выявления CNV.

Таким образом, современные методы исследования генетического полиморфизма TLRs представляют собой мощный арсенал, который позволяет получать всестороннюю информацию о генетической изменчивости и ее влиянии на иммунный ответ человека, открывая путь к персонализированной медицине.

Заключение

Путешествие в мир генетического полиморфизма Толл-подобных рецепторов (TLRs) раскрывает перед нами сложную и многогранную картину взаимодействия генов, окружающей среды и здоровья человека. Мы увидели, что TLRs — это не просто белковые структуры, а ключевые молекулярные сенсоры врожденного иммунитета, способные распознавать широкий спектр патогенов и запускать мощные защитные реакции. Их функциональность, однако, не является статичной; она постоянно модулируется генетическими вариациями, которые, подобно индивидуальному почерку, отличают каждого человека.

Генетический полиморфизм, будь то однонуклеотидные замены (SNP) или более крупные изменения, такие как инсерции/делеции и вариации числа копий (CNV), создает огромное разнообразие в генах TLRs. Большая часть этих изменений может быть «молчащей», но те, что влияют на экспрессию или функцию рецепторов, имеют глубокие клинические последствия. Мы подробно рассмотрели, как конкретные полиморфизмы в генах TLR1, TLR2, TLR3, TLR4 и TLR6 могут изменять конфигурацию рецептора, его способность связывать лиганды и передавать сигналы, что приводит к изменению иммунного ответа.

Популяционное распределение этих полиморфизмов неслучайно. Оно сформировано тысячелетиями эволюции под давлением естественного отбора, миграций и адаптации к специфическим патогенам. Различия в частотах аллелей между этническими и географическими группами являются наглядным свидетельством этой динамичной истории, объясняя, почему одна популяция может быть более устойчивой к определенной инфекции, чем другая.

Клиническое значение полиморфизмов TLRs пронизывает весь спектр человеческих заболеваний. От восприимчивости к инфекциям, таким как COVID-19, пневмония и инфекционный эндокардит, до предрасположенности к аутоиммунным и воспалительным состояниям (например, саркоидоз легких, атопическая астма, синдром старческой астении), а также к онкологическим и сердечно-сосудистым заболеваниям — везде прослеживается роль генетических вариаций в генах TLRs. Понимание этих связей открывает двери для разработки персонализированных подходов в медицине, позволяя прогнозировать риски, оптимизировать терапию и даже разрабатывать профилактические стратегии.

Наконец, современные методы молекулярной генетики, такие как полимеразная цепная реакция в различных ее модификациях (ПЦР-ПДРФ, аллель-специфичная ПЦР в реальном времени) и высокопроизводительное секвенирование (NGS), в сочетании с мощными биоинформатическими инструментами, позволяют нам не только выявлять, но и глубоко анализировать эти генетические вариации. Они дают возможность не просто констатировать факт полиморфизма, но и прогнозировать его функциональные последствия и клиническую значимость.

В заключение, генетический полиморфизм TLRs представляет собой фундаментальный аспект нашей иммунной идентичности. Дальнейшие исследования в этой области будут иметь решающее значение для углубления нашего понимания патогенеза многих заболеваний, развития персонализированной медицины и создания новых, более эффективных диагностических и терапевтических стратегий, учитывающих уникальный генетический профиль каждого человека.

Список использованной литературы

1. Кузьминова Е. П., Бурмистрова Ю. Ю., СусловаТ. А. Полиморфизм генов TLR2 и TLR4 у ожоговых больных с сепсисом // Вестник Челябинского государственного университета. 2013. № 7 (298). Биология. Вып. 2. С. 21–23.
2. Распознавание в системе врожденного иммунитета : Учеб.-метод. пособие / Д. А. Черношей, Е. Ю. Кирильчик, Т. А. Канашкова. Минск: БГМУ, 2009. 49 с.
3. Симбирцев А.С. Толл-белки: специфические рецепторы неспецифического иммунитета // Иммунология. 2005. Т. 26. № 6. С. 368-377.
4. Симбирцев, А. С., Громова А. Ю. Функциональный полиморфизм генов регуляторных молекул воспаления // Цитокины и воспаление. 2005. Т. 4, № 1. С. 3–10.
5. Толл-подобные рецепторы женского репродуктивного тракта и их лиганды / О.П. Лебедева, П.В. Калуцкий, С.П. Пахомов и др. // Научные ведомости БелГУ. Сер. Медицина. Фармация. 2010. № 22, вып. 12. С. 31-35.
6. Толстопятова М. А., Буслаева Г. А., Козлов И. Г. Роль рецепторов врожденного иммунитета в развитии инфекционной патологии у новорожденных детей // Педиатрия. 2009. Т. 87, № 1. С. 115 — 120.
7. Цыган, В. Н. Генетический полиморфизм иммуногенной сигнальной системы / В. Н. Цыган, А. М. Иванов, Т. А. Камилова [и др.] // Журн. инфектологии. 2011. Т. 3, № 2. С. 21–27.
8. Хаитов Р.М., Пащенков М.В., Пинегин Б.В. Роль паттернраспознающих рецепторов во врожденном и адаптивном иммунитете // Иммунология. 2009. № 1. С. 66—76.
9. Akira A., Takeda K. Toll-like receptor signaling // Nat Rev Immun. 2004. № 4. P. 499—511.
10. Barreiro L.B., Quintana-Murci L. From evolutionary genetics to human immunology: how selection shapes host defence genes // Nat Rev Genet. 2010. Jan;11(1):17-30.
11. Cartwright N, McMaster SK, Sorrentino R, et al. Elucidation of toll-like receptor and adapter protein signaling in vascular dysfunction induced by gram-positive Staphylococcus aureus or gram-negative Escherichia coli // Shock. 2007. № 27. P. 40-47.
12. Edfeldt K, Swedenborg J, Hansson GK, Yan ZQ. Expression of toll-like receptors in human atherosclerotic lesions: A possible pathway for plaque activation // Circulation. 2002. № 105. P. 1158–1161.
13. Hayashi F., Shmith K.D., Ozinsky A. et al. The innate immune response to bacterial flagellin is mediated Toll-like receptor 5 // Nature. 2001. № 410. P. 1099—1103.
14. Hemmi H, Takeuchi O, Kawai T, Kaisho T, Sato S, Sanjo H, Matsumoto M, Hoshino K, Wagner H, Takeda K, Akira S. A Toll-like receptor recognizes bacterial DNA // Nature. 2000. № 408. P. 740–745.
15. Lorenz E., Mira J.P., Cornish K.L., Arbour N.C. et al. A novel polymorphism in the toll-like receptor 2 gene and its potencial association with staphylococcal infection // Infect Immun. 2000. № 68: 11. P. 6398—401.
16. Medzitov R. Toll-like receptors and innate immunity // Nature Rev Immunol. 2001. № 1. P. 136-144.
17. Novak N., Yu C.F., Bussman C., Maintz L. et al. Putative association of a TLR9 promoter polymorphism with atopic eczema // Allergy. 2007. № 62: 7. P. 766—72.
18. Quintana-Murci L, Clark AG. Population genetic tools for dissecting innate immunity in humans // Nat Rev Immunol. 2013. Apr;13(4):280-93.
19. Stoll LL, Denning GM, Weintraub NL. Endotoxin, TLR4 signaling and vascular inflammation: potential therapeutic targets in cardiovascular disease // Curr Pharm Des. 2006. № 12. P. 4229-4245.
20. Thomas P.E., Klinger R., Furlong L.I., Hofmann-Apitius M., Friedrich C.M. Challenges in the association of human single nucleotide polymorphism mentions with unique database identifiers // BMC Bioinformatics. 2011. 12(Suppl 4):S4.
21. Генетический полиморфизм // Сеченовский университет. 2015. URL: http://sechenov.ru/upload/medialibrary/125/k_nekotorym_voprosam_evolyucii.doc (дата обращения: 30.10.2025).
22. Леонов Д.В., Устинов Е.М., Деревянная В.О. и др. Генетический полиморфизм. Значение. Методы исследования // Cyberleninka.ru. 2019. URL: https://cyberleninka.ru/article/n/geneticheskiy-polimorfizm-znachenie-metody-issledovaniya (дата обращения: 30.10.2025).
23. Генотек. Генетический полиморфизм: исследование пиросеквенированием // Генотек. 2021. URL: https://www.genotek.ru/blog/geneticheskij-polimorfizm-issledovanie-pirosekvenirovaniem/ (дата обращения: 30.10.2025).
24. Генокарта. Словарь терминов — Термин | Генокарта — генетическая энциклопедия. URL: https://genokarta.ru/slovar/geneticheskiy-polimorfizm (дата обращения: 30.10.2025).
25. Zhang Y., Liu J., Wang C., Liu J., Lu W. Toll-Like Receptors Gene Polymorphisms in Autoimmune Disease // PubMed. 2021. URL: https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/33981318/ (дата обращения: 30.10.2025).
26. Дворникова К.А., Быстрова Е.Ю., Платонова О.Н., Ноздрачев А.Д. ПОЛИМОРФИЗМ ГЕНОВ TOLL-ПОДОБНЫХ РЕЦЕПТОРОВ И АССОЦИИРОВАННЫЕ С НИМ ЗАБОЛЕВАНИЯ // Молекулярная медицина. 2016. URL: https://www.molmed.ru/journal/mm_2016_4/dwornikowa.php (дата обращения: 30.10.2025).
27. Белоглазов В.А., Яцков И.А., Камший А.А., Агзамова Ю.М. РОЛЬ ПОЛИМОРФИЗМА ГЕНОВ TOLL-LIKE РЕЦЕПТОРОВ В ПАТОГЕНЕЗЕ НОВОЙ КОРОНАВИРУСНОЙ ИНФЕКЦИИ // Cyberleninka.ru. 2021. URL: https://cyberleninka.ru/article/n/rol-polimorfizma-genov-toll-like-retseptorov-v-patogeneze-novoy-koronavirusnoy-infektsii (дата обращения: 30.10.2025).
28. Евдокимов А.В., Суслова Т.А., Беляева С.В. и др. ПОЛИМОРФИЗМ ГЕНОВ TLR И ТЕЧЕНИЕ ДВУСТОРОННЕЙ ПНЕВМОНИИ ПРИ COVID-19 // Medical Academic Journal. 2021. URL: https://journals.eco-vector.com/MAJ/article/view/90324 (дата обращения: 30.10.2025).
29. Симонова Р.Ф., Зиновьева И.Ф., Борзенкова С.А., Чупров А.В. Особенности полиморфизма генов толл-лайк рецепторов (TLR-2, TLR-3, TLR-4 и TLR-6) при открытоугольной глаукоме // Медицинский вестник Башкортостана. 2021. URL: https://vavilov.elpub.ru/jour/article/view/1655/1218 (дата обращения: 30.10.2025).
30. Зайцева М.А., Брагвадзе Б.Г., Свитич О.А. и др. Анализ экспрессии генов TLRs и ассоциации полиморфизмов гена DEFB1 у детей с бронхиальной астмой // Cyberleninka.ru. 2017. URL: https://cyberleninka.ru/article/n/analiz-ekspressii-genov-tlrs-i-assotsiatsii-polimorfizmov-gena-defb1-u-detey-s-bronhialnoy-astmoy (дата обращения: 30.10.2025).
31. Епифанцева Н.В., Витковский Ю.А., Мудров В.А. РОЛЬ ПОЛИМОРФИЗМА ГЕНА TLR-4 В РАЗВИТИИ И ТЕЧЕНИИ КИШЕЧНОЙ ИНФЕКЦИИ // Cyberleninka.ru. 2017. URL: https://cyberleninka.ru/article/n/rol-polimorfizma-gena-tlr-4-v-razvitii-i-techenii-kishechnoy-infektsii (дата обращения: 30.10.2025).
32. Долгих М.И., Учакина В.А., Огородова О.А. и др. Генетический полиморфизм TOLL-подобного рецептора-3 у больных пневмонии // Cyberleninka.ru. 2013. URL: https://cyberleninka.ru/article/n/geneticheskiy-polimorfizm-toll-podobnogo-retseptora-3-u-bolnyh-pnevmonii (дата обращения: 30.10.2025).
33. Левкович М.А., Галкина Г.А., Крукиер И.И. и др. Значение экспрессии TLRs и полиморфизма их генов в развитии сосудистых осложнений при сахарном диабете // Cyberleninka.ru. 2017. URL: https://cyberleninka.ru/article/n/znachenie-ekspressii-tlrs-i-polimorfizma-ih-genov-v-razvitii-sosudistyh-oslozhneniy-pri-saharnom-diabete (дата обращения: 30.10.2025).
34. Понасенко А.В., Жидкова И.И., Кутихин А.Г. и др. АССОЦИАЦИЯ ПОЛИМОРФИЗМА ГЕНОВ ТОЛЛ-ПОДОБНЫХ РЕЦЕПТОРОВ (TLR-2, TLR-4 И TLR-6) // Cyberleninka.ru. 2017. URL: https://cyberleninka.ru/article/n/assotsiatsiya-polimorfizma-genov-toll-podobnyh-retseptorov-tlr-2-tlr-4-i-tlr-6 (дата обращения: 30.10.2025).
35. Зыков В.И., Кандрашина И.В., Бобровская О.И. и др. РОЛЬ ПОЛИМОРФИЗМОВ TLR2, TLR4, TLR7 В ОЦЕНКЕ РИСКА РАЗВИТИЯ РАЗЛИЧНЫХ СТЕПЕНЕЙ ТЯЖЕСТИ COVID-19 // Cyberleninka.ru. 2025. URL: https://cyberleninka.ru/article/n/rol-polimorfizmov-tlr2-tlr4-tlr7-v-otsenke-riska-razvitiya-razlichnyh-stepeney-tyazhesti-covid-19 (дата обращения: 30.10.2025).
36. Барбараш О.Л., Головкин А.С., Понасенко А.В. и др. РОЛЬ ПОЛИМОРФИЗМА ГЕНОВ TOLL-ПОДОБНЫХ РЕЦЕПТОРОВ В РАЗВИТИИ ОСЛОЖНЕНИЙ АТЕРОСКЛЕРОЗА // Cyberleninka.ru. 2015. URL: https://cyberleninka.ru/article/n/rol-polimorfizma-genov-toll-podobnyh-retseptorov-v-razvitii-oslozhneniy-ateroskleroza (дата обращения: 30.10.2025).
37. Кольцова Р.Г., Карташова Л.С., Смирнова Н.Н. и др. АССОЦИАЦИЯ ПОЛИМОРФИЗМА ГЕНА TLR2 ARG753GLN С УРОВНЕМ ЕГО ЭКСПРЕССИИ У ДОЛГОЖИТЕЛЕЙ // Cyberleninka.ru. 2024. URL: https://cyberleninka.ru/article/n/assotsiatsiya-polimorfizma-gena-tlr2-arg753gln-s-urovnem-ego-ekspressii-u-dolgozhiteley (дата обращения: 30.10.2025).
38. Понасенко А.В., Кутихин А.Г., Хуторная М.В. и др. Связь полиморфизмов генов системы TLR с риском развития инфекционного эндокардита // Cyberleninka.ru. 2015. URL: https://cyberleninka.ru/article/n/svyaz-polimorfizmov-genov-sistemy-tlr-s-riskom-razvitiya-infektsionnogo-endokardita (дата обращения: 30.10.2025).
39. Сажин А.Ф., Адамова И.Ю., Свешникова Н.М. и др. Полиморфизм генов, ассоциированных с инфекционными заболеваниями легких, в популяциях Северной Азии и среди пациентов с внебольничными пневмониями // Вавиловский журнал генетики и селекции. 2023. URL: https://www.vavilov.ru/articles/polimorfizm-genov-associirovannyh-s-infekcionnymi-zabolevaniyami-legkih-v-populyaciyah-severnoy-azii-i-sredi-pacientov-s-vnebolnichnymi-pnevmoniyami (дата обращения: 30.10.2025).
40. Фаттахова Р.Г., Медвинский А.Ю., Кандрашина В.А. НАБЛЮДАЕМЫЕ ПОЛИМОРФИЗМЫ ГЕНОВ TLR2 И TLR3 ВРОЖДЁННОГО ИММУНИТЕТА КРУПНОГО РОГАТОГО СКОТА // Cyberleninka.ru. 2025. URL: https://cyberleninka.ru/article/n/nablyudaemye-polimorfizmy-genov-tlr2-i-tlr3-vrozhdyonnogo-immuniteta-krupnogo (дата обращения: 30.10.2025).
41. Булгакова И.Д., Свитич О.А., Зверев В.В. МЕХАНИЗМЫ ФОРМИРОВАНИЯ ТОЛЕРАНТНОСТИ TOLL-ПОДОБНЫХ РЕЦЕПТОРОВ ПОД ДЕЙСТВИЕМ МИКРОБНЫХ ЛИГАНДОВ // Cyberleninka.ru. 2020. URL: https://cyberleninka.ru/article/n/mehanizmy-formirovaniya-tolerantnosti-toll-podobnyh-retseptorov-pod-deystviem-mikrobnyh-ligandov (дата обращения: 30.10.2025).
42. Формы естественного отбора — что это, определение и ответ // Biologia.life. URL: https://biologia.life/teoriya-evolyutsii/formy-estestvennogo-otbora (дата обращения: 30.10.2025).