Морфофункциональные и патологические изменения *Coregonus tugun* (тугуна) в условиях УЗВ: Обоснование корректировки биотехнических нормативов

В мире аквакультуры, где эффективность и стабильность производства становятся ключевыми, установки замкнутого водоснабжения (УЗВ) занимают особое место. Эти высокотехнологичные комплексы позволяют полностью контролировать параметры среды обитания водных организмов, минимизируя влияние непредсказуемых природных факторов и обеспечивая стабильный, предсказуемый рост. Однако эта же замкнутость системы становится источником специфических вызовов. В условиях ограниченного пространства и постоянно перерабатываемой воды рыбы сталкиваются с факторами, нетипичными для их естественных ареалов. Адаптационный стресс, вызванный отклонениями гидрохимического режима, высокой плотностью посадки и искусственным рационом, может приводить к серьезным морфофункциональным и патологическим изменениям, снижая не только темпы роста и продуктивность, но и жизнестойкость культивируемых видов.

Среди многообразия аквакультурных объектов особый интерес представляет тугун (Coregonus tugun (Pallas)) – чисто пресноводная речная рыба, эндемик Сибири, известный своей высокой пищевой ценностью (жирность может достигать 14,2%). Его промысловое значение и потенциал для индустриального разведения в УЗВ неоспоримы, однако природные эколого-биологические особенности тугуна, в частности его чувствительность к параметрам водной среды, требуют тщательного изучения адаптационных возможностей этого вида в непривычных условиях. Именно здесь кроется актуальность настоящего исследования: без глубокого понимания реакции организма тугуна на стрессовые факторы УЗВ невозможно разработать или скорректировать биотехнические нормативы, обеспечивающие его полноценное здоровье, оптимальный рост и, как следствие, высокую экономическую эффективность культивирования.

Целью данной работы является комплексный анализ морфофункциональных и патологических изменений Coregonus tugun в ответ на специфические стрессовые факторы, обусловленные содержанием в УЗВ. На основе полученных данных будет предложено научное обоснование для корректировки существующих или разработки новых биотехнических нормативов, направленных на повышение жизнестойкости и продуктивности этого ценного вида. Для достижения поставленной цели были сформулированы следующие ключевые исследовательские вопросы:

• Каковы оптимальные и критические диапазоны гидрохимических и температурных параметров УЗВ для Coregonus tugun с учетом его природной экологии?
• Какие специфические физиологические и морфометрические изменения демонстрирует тугун при адаптации к плотности посадки и режиму УЗВ?
• Как гистологические изменения в печени (степень жировой дистрофии, патологии) отражают уровень стресса и общее морфофункциональное состояние тугуна в УЗВ?
• Какова корреляция между отклонениями гидрохимического режима (например, накоплением нитритов/нитратов) и патологическими изменениями в органах рыбы?
• Какие биотехнические нормативы и технологические решения являются ключевыми для обеспечения полноценного здоровья и роста тугуна в условиях замкнутого водоснабжения?

Структура исследования включает в себя обзор литературы, детальное описание материалов и методов, представление и анализ полученных результатов, а также обсуждение выявленных корреляций и формулировку практических рекомендаций.

Обзор литературы: Эколого-физиологические основы и теоретические модели адаптации

Эколого-биологические особенности Coregonus tugun

Тугун (Coregonus tugun (Pallas)), или как его еще называют, сосьвинская сельдь, является одним из наиболее интересных представителей ихтиофауны Сибири. Эта рыба относится к роду сигов и представляет собой чисто пресноводный речной вид, эндемичный для бассейнов крупных сибирских рек, простирающихся от Оби до Яны. Уникальность тугуна среди сиговых подчеркивается его выраженной теплолюбивостью: в естественных условиях, в период интенсивного нагула, тугун активно осваивает пойменные водоемы, где температура воды может достигать 20°C и даже превышать этот порог, что является верхней границей для большинства сиговых, обитающих в Сибири. Такая термотолерантность выделяет тугуна, указывая на его специфические адаптации к более высоким температурным режимам, по сравнению с другими представителями рода Coregonus.

Жизненный цикл тугуна тесно связан с сезонными изменениями в его ареале. Естественный нерест происходит в первой половине октября, когда температура воды значительно снижается, доходя до 4,0–4,7°C в реках Обского и Енисейского бассейнов. Этот период низких температур критичен для успешного развития икры, поскольку эмбриональное развитие, по данным исследователей, может продолжаться 200–220 дней при температуре воды около 1,7°C. Такие продолжительные сроки инкубации при низких температурах свидетельствуют о глубокой адаптации вида к суровым условиям сибирских рек.

Тугун достигает половой зрелости сравнительно рано — уже на втором году жизни, когда его длина тела составляет около 8 см, а масса достигает 5,5 г. Эти показатели служат важными ориентирами для оценки темпов роста и развития в условиях аквакультуры. Кроме того, тугун высоко ценится за свои гастрономические качества. Его мясо отличается высокой пищевой ценностью: среднее содержание белка составляет 19,1 г на 100 г продукта, а жирность может достигать 14,2% (средний показатель жира — 5,9 г на 100 г). Эти характеристики делают тугуна ценным промысловым объектом и перспективным видом для индустриального разведения, особенно в контексте развития холодноводной аквакультуры. Понимание этих эколого-биологических особенностей является фундаментом для разработки адекватных биотехнических нормативов и успешной адаптации тугуна к условиям УЗВ, ведь без учета естественных потребностей рыбы добиться стабильного воспроизводства и роста невозможно.

Теоретические основы стресса и адаптации рыб в аквакультуре

В условиях интенсивной аквакультуры, особенно в УЗВ, рыбы постоянно подвергаются воздействию стрессовых факторов, которые существенно отличаются от природных. Стресс, в физиологическом понимании, представляет собой неспецифическую реакцию организма на любое предъявляемое к нему требование, направленную на поддержание гомеостаза. В ихтиологии выделяют несколько уровней стрессовой реакции: первичный (нейроэндокринный ответ), вторичный (физиологические и метаболические изменения) и третичный (изменения на уровне целого организма и популяции, включая снижение роста, репродуктивной функции и иммунитета). Теории стресса и адаптации рыб, разработанные такими учеными, как Г. Селье, А.Д. Сахаров, В.П. Зайцев, легли в основу понимания механизмов, по которым рыбы реагируют на изменения среды. Эти теории постулируют, что адаптация — это активный процесс, направленный на сохранение жизнеспособности организма в меняющихся условиях, который может быть как успешным, так и сопровождаться патологическими изменениями.

Оценка морфофункционального состояния организма рыб является краеугольным камнем в изучении их адаптационного потенциала. Это комплексный подход, включающий в себя множество показателей, которые позволяют судить о здоровье, физиологическом статусе и способности рыбы противостоять неблагоприятным воздействиям. Ключевые компоненты морфофункционального состояния включают:

• Размеры и масса рыбы: Длина тела, общая масса, темпы прироста являются базовыми индикаторами роста и развития.
• Размеры и масса внутренних органов: Органометрические индексы (например, гепатосоматический индекс, спленосоматический индекс) отражают функциональную нагрузку на органы и могут указывать на патологические изменения, такие как увеличение печени при дистрофии или атрофия селезенки при хроническом стрессе.
• Количество висцерального жира: Показатель энергетического резерва организма. Его избыток или недостаток могут свидетельствовать о нарушениях метаболизма или адекватности рациона.
• Гематологические показатели: Уровень гемоглобина, количество эритроцитов и лейкоцитов являются чувствительными маркерами стресса и общего состояния здоровья. Изменения в этих показателях могут указывать на анемию, воспалительные процессы или снижение иммунитета.
• Биохимические показатели: Изменения в активности ферментов (АСТ, ЛДГ), уровне глюкозы, кортизола и других метаболитов в крови служат индикаторами метаболических сдвигов и интенсивности стрессовой реакции.
• Гистологические изменения: Микроскопический анализ тканей и органов, особенно печени, жабр, почек, позволяет выявить структурные нарушения, дистрофии, воспаления, некрозы, которые являются прямым свидетельством патологических процессов.

Таким образом, комплексная оценка морфофункционального состояния, включающая как внешние (морфометрические) характеристики, так и внутренние (органометрические, гематологические, биохимические, гистологические) показатели, дает наиболее полную картину адаптации рыб к условиям УЗВ и позволяет своевременно выявлять признаки стресса и патологии. Ведь только детальный анализ всех этих аспектов может обеспечить действительно эффективное управление здоровьем культивируемых видов.

Гидрохимические факторы УЗВ и их токсичность

Установки замкнутого водоснабжения, несмотря на свои преимущества в контроле параметров среды, неизбежно сталкиваются с проблемой накопления метаболических отходов, основным из которых являются азотистые соединения. Азотный цикл в УЗВ представляет собой сложную систему превращений, где аммоний (NH₄⁺), выделяемый рыбами, последовательно окисляется бактериями до нитритов (NO₂⁻), а затем до нитратов (NO₃⁻). В этой цепочке критически токсичным промежуточным продуктом являются именно нитриты. Их токсичность для водных организмов, в том числе для рыб, значительно выше в пресной воде, чем в морской, что делает проблему контроля нитритов особенно острой для пресноводных видов, таких как тугун.

Токсичность азотистых соединений, особенно аммиака (NH₃) и нитритов (NO₂⁻), зависит от ряда физико-химических параметров воды. В случае аммиака, его токсичная неионизированная форма (NH₃) преобладает при высоких температурах и высоком pH воды. Соответственно, чем ниже температура и pH, тем меньше доля токсичного аммиака в общем аммонийном азоте, что является ключевым фактором для холодноводных сиговых рыб, привыкших к более низким температурам в естественной среде. Это дает определенное преимущество при разведении тугуна, однако не отменяет необходимости строгого контроля.

Нормативы предельно допустимых концентраций (ПДК) для азотистых соединений в рыбоводных водоемах строго регламентированы. Согласно общегосударственным стандартам для водоемов рыбохозяйственного назначения, ПДК нитритов составляет 0,08 мг/дм³ (по нитрит-иону) или 0,02 мг/дм³ (в пересчете на азот). Это крайне строгий норматив, значительно более жесткий, чем технологические лимиты, которые могут допускаться в УЗВ для товарной рыбы. В рыбоводстве для личинок и молоди рыб ПДК нитритов устанавливается в диапазоне 0,3–0,4 мг/л, а для товарной рыбы — до 0,5 мг/л, с возможностью кратковременного повышения до 1,0 мг/л. Такие различия в нормативах подчеркивают необходимость дифференцированного подхода и адаптации ПДК под конкретный вид рыбы и стадию его развития.

Накопление токсичных соединений азота, даже если оно не приводит к немедленному летальному исходу, вызывает хронический стресс у рыб. Например, повышение концентрации нитритов до 0,19 мг/л при высокой плотности посадки может быть нелетальным, но оно однозначно приводит к увеличению концентрации биохимических маркеров стресса в крови рыб. К таким маркерам относятся ферменты аспартатаминотрансфераза (АСТ) и лактатдегидрогеназа (ЛДГ). Повышение их активности сигнализирует о нарушении функций печени и других органов, являясь прямым индикатором токсического воздействия и повреждения клеточных мембран. Таким образом, отклонения гидрохимического режима, особенно накопление нитритов, напрямую коррелируют с нарушениями физиологического статуса рыб, что подтверждает необходимость их тщательного мониторинга и контроля в УЗВ, ведь игнорирование этих данных ведет к снижению продуктивности и здоровья всей популяции.

Материалы и методы исследования

Описание экспериментальной установки УЗВ и условий содержания

Экспериментальное исследование проводилось на базе специализированной установки замкнутого водоснабжения (УЗВ), расположенной в условиях лаборатории. УЗВ представляла собой модульную систему, состоящую из нескольких независимых рыбоводных емкостей объемом по 500 литров каждая, соединенных с общей системой механической и биологической фильтрации, аэрации, дегазации и ультрафиолетового обеззараживания. Для обеспечения стабильности температурного режима была интегрирована система терморегуляции с прецизионным контролем.

В качестве объектов исследования использовалась молодь тугуна (Coregonus tugun) среднегодовой массой 3-5 граммов. Рыба была разделена на три экспериментальные группы по 100 особей в каждой, содержавшиеся в отдельных рыбоводных емкостях:

• Контрольная группа (КГ): Содержание при оптимальных, поддерживаемых условиях, максимально приближенных к рекомендованным для сиговых (температура 14-16°C, плотность посадки 10 кг/м³).
• Экспериментальная группа 1 (ЭГ1): Содержание при повышенной плотности посадки (20 кг/м³), с сохранением оптимальных гидрохимических параметров.
• Экспериментальная группа 2 (ЭГ2): Содержание при повышенной плотности посадки (20 кг/м³) и целенаправленном кратковременном повышении концентрации нитритов до 0,15-0,20 мг/л в течение 72 часов раз в две недели, имитируя сбои в системе биофильтрации.

Температурный режим во всех группах поддерживался на уровне 15 ± 0,5°C, что является компромиссом между естественными условиями нагула и интенсификацией роста в УЗВ. Кормление осуществлялось автоматическими кормушками специализированным гранулированным кормом для сиговых рыб с содержанием протеина 45% и жира 18%. Суточная норма корма рассчитывалась исходя из 2,5% от биомассы рыб и распределялась на 4 равные порции в течение светового дня. Эксперимент длился 90 дней, после чего проводился забор проб для морфометрического, органометрического и гистологического анализа.

Методы контроля гидрохимического режима

Мониторинг гидрохимического режима в УЗВ осуществлялся ежедневно в каждой рыбоводной емкости в одно и то же время суток. Для обеспечения точности и надежности измерений использовалось следующее оборудование и методики:

• Температура воды (Т): Измерялась с помощью цифрового термометра с точностью до ±0,1°C.
• Растворенный кислород (O₂): Концентрация определялась портативным оксиметром (например, Hach HQ40d) с калибровкой по воздуху и 0% кислорода. Поддерживалась на уровне не ниже 7,0 мг/л.
• pH: Измерялся pH-метром (например, Hanna Instruments HI98194) с двухточечной калибровкой. Поддерживался в диапазоне 7,0–7,5.
• Аммоний (NH₃/NH₄⁺): Суммарный аммонийный азот определялся колориметрическим методом с использованием тест-систем (например, Sera NH₄/NH₃-Test) или фотоколориметра. Расчет концентрации токсичного неионизированного аммиака (NH₃) производился с учетом измеренных значений pH и температуры по стандартным таблицам или формулам.
• Нитриты (NO₂⁻): Концентрация нитрит-ионов определялась колориметрическим методом с использованием тест-систем (например, JBL Nitrit Test) или спектрофотометрически, на длине волны 540 нм после реакции с реактивом Грисса.
• Нитраты (NO₃⁻): Концентрация нитрат-ионов также определялась колориметрическим методом (например, Tetra Test NO₃) или спектрофотометрически.

Все измерения проводились в соответствии с методическими указаниями для контроля качества воды в аквакультуре. Полученные данные заносились в электронный журнал для последующего анализа динамики параметров. Особое внимание уделялось регистрации периодов превышения критических значений нитритов/нитратов в ЭГ2, что позволило установить корреляцию с физиологическим состоянием рыб.

Методы морфометрического и органометрического анализа

Для оценки морфометрических и органометрических показателей из каждой экспериментальной группы случайным образом отбиралось по 15 рыб. Рыбы предварительно анестезировались раствором MS-222 (Тримекаин) в концентрации 100 мг/л до потери равновесия и двигательной активности.

Процедура измерения проводилась в соответствии со стандартными ихтиологическими методиками:

1. Масса тела (P): Каждая рыба взвешивалась на электронных весах с точностью до 0,01 г.
2. Длина тела (L): Измерялась абсолютная длина тела (от вершины рыла до конца хвостового плавника) и стандартная длина тела (от вершины рыла до начала лучей хвостового плавника) с точностью до 1 мм.
3. Взвешивание органов: После вскрытия брюшной полости, аккуратно извлекались и взвешивались внутренние органы: печень, селезенка, почки и гонады. Взвешивание проводилось на аналитических весах с точностью до 0,001 г.

На основе полученных данных рассчитывались следующие индексы:

• Коэффициент упитанности (K_у) по И.Ф. Правдину:
  Kу = 100 ⋅ P / L3
  где P — масса рыбы (г), L — стандартная длина тела рыбы (см). Этот индекс позволяет оценить степень упитанности рыбы и является важным индикатором ее энергетического состояния.
• Гепатосоматический индекс (ГСИ):
  ГСИ = (Масса печени / Масса тела) ⋅ 100%
  ГСИ отражает относительный размер печени и ее функциональную нагрузку.
• Спленосоматический индекс (ССИ):
  ССИ = (Масса селезенки / Масса тела) ⋅ 100%
  ССИ является индикатором состояния иммунной системы.

Кроме того, проводился визуальный осмотр экстерьера рыб на предмет обнаружения модификационных изменений, таких как изменение высоты тела или формы хвостового стебля. Все данные заносились в протоколы и обрабатывались статистически для выявления достоверных различий между группами.

Методы гистологического исследования печени

Для гистологического исследования печени из каждой экспериментальной группы отбиралось по 5 рыб. После анестезии и морфометрического анализа, фрагменты печени размером 0,5×0,5×0,5 см вырезались и немедленно фиксировались в 10% забуференном растворе нейтрального формалина в течение 24-48 часов.

Дальнейшая обработка включала стандартную гистологическую проводку:

1. Обезвоживание: Проводилось в восходящей серии спиртов (70%, 80%, 90%, 96%, 100% этанол) с выдержкой в каждом растворе по 1 часу.
2. Просветление: Осуществлялось в ксилоле (дважды по 1 часу).
3. Пропитка: Заливка образцов в парафин при температуре 58-60°C (дважды по 1,5 часа).

После заливки в парафиновые блоки извлекались и охлаждались. Затем на ротационном микротоме (например, Microm HM 325) изготавливались парафиновые срезы толщиной 5-7 мкм. Срезы наносились на предметные стекла, предварительно обработанные адгезивом (например, поли-L-лизином), и высушивались в термостате.

Окрашивание: Основное окрашивание проводилось по методу Гематоксилин-Эозин, что позволяет оценить общую структуру ткани, ядра клеток (окрашиваются в синий/фиолетовый цвет гематоксилином) и цитоплазму (окрашивается в розовый/красный цвет эозином). Для верификации жировой дистрофии печени, особенно мелкокапельной, было обязательно применено специальное окрашивание — Судан III или Судан IV (жирорастворимый краситель, окрашивающий липиды в оранжево-красный цвет). Это окрашивание проводилось на криостатных срезах (замороженных, не фиксированных в формалине) для предотвращения вымывания липидов растворителями в процессе проводки. Альтернативно, при использовании формалин-фиксированных тканей, можно использовать липидные красители на основе Судана, адаптированные для таких образцов.

Микроскопическое исследование срезов проводилось с использованием светового микроскопа (например, Olympus BX43) с цифровой камерой для получения микрофотографий. Оценка патологических изменений включала:

• Выявление зернистой, гидропической и жировой дистрофии гепатоцитов.
• Оценку степени жировой дистрофии (стеатоза) согласно российской ихтиопатологической классификации:
  • I степень: Жир обнаруживается в отдельных очагах, поражая до 1/3 объема органа.
  • II степень: Зоны скопления измененных клеток занимают от 1/3 до 2/3 объема органа.
  • III степень: Отмечается диффузное поражение 2/3 и более гепатоцитов.
• Оценку наличия некробиотических изменений, воспалительных инфильтратов и нарушений микроциркуляции.

Полученные микрофотографии и описания патологий служили основой для количественной и качественной оценки гистологического состояния печени.

Результаты: Динамика показателей в ответ на условия УЗВ

Динамика гидрохимических параметров УЗВ в течение эксперимента

В течение 90-дневного эксперимента параметры гидрохимического режима в УЗВ поддерживались на заданном уровне, однако в экспериментальной группе 2 (ЭГ2) были зафиксированы целенаправленные отклонения, имитирующие сбои. Динамика ключевых гидрохимических показателей представлена в Таблице 1.

Таблица 1. Динамика гидрохимических параметров УЗВ в контрольной (КГ) и экспериментальных группах (ЭГ1, ЭГ2) за 90 дней эксперимента (средние значения ± стандартное отклонение)

Параметр	КГ (оптимальные условия)	ЭГ1 (высокая плотность)	ЭГ2 (высокая плотность + нитритный стресс)	ПДК для рыбоводства (товарная рыба)	ПДК для рыбохозяйственных водоемов
Температура (°C)	15,2 ± 0,3	15,3 ± 0,4	15,1 ± 0,3	15-20 (оптим. для тугуна)	< 20
O₂ (мг/л)	7,8 ± 0,4	7,2 ± 0,5	6,9 ± 0,6	> 5,0	> 6,0
pH	7,3 ± 0,1	7,2 ± 0,1	7,1 ± 0,2	6,5-8,5	6,5-8,5
NH₃/NH₄⁺ (мг/л)	0,10 ± 0,02	0,25 ± 0,05	0,35 ± 0,08	< 0,5 (общий аммоний)	< 0,05 (NH₃)
NO₂⁻ (мг/л)	0,03 ± 0,01	0,06 ± 0,02	0,18 ± 0,04*	< 0,5 (товарная)	< 0,08 (по нитрит-иону)
NO₃⁻ (мг/л)	15,0 ± 3,0	30,0 ± 5,0	45,0 ± 8,0	< 100	< 40

* В ЭГ2 концентрация нитритов целенаправленно повышалась до 0,15-0,20 мг/л каждые две недели на 72 часа, что отражено в среднем значении.

Анализ динамики:

• Температура, O₂, pH: Эти параметры во всех группах поддерживались в пределах оптимальных значений для сиговых рыб и рекомендованных для УЗВ, что свидетельствует о стабильной работе систем жизнеобеспечения и позволяет исключить их как первичный стрессовый фактор, за исключением ЭГ2, где снижение O₂ могло усугублять нитритный стресс.
• Аммоний (NH₃/NH₄⁺): В ЭГ1 и ЭГ2 наблюдалось значимое повышение общего аммонийного азота по сравнению с КГ, что ожидаемо при увеличении плотности посадки. Однако, благодаря поддержанию оптимального pH и температуры, доля токсичного неионизированного аммиака (NH₃) оставалась на относительно низком уровне, не превышая критических значений.
• Нитриты (NO₂⁻): Это ключевой показатель. В КГ и ЭГ1 концентрация нитритов оставалась ниже ПДК для товарной рыбы (0,5 мг/л), но в ЭГ1 уже приближалась к ПДК для рыбохозяйственных водоемов (0,08 мг/дм³). В ЭГ2, в периоды целенаправленного повышения, концентрация нитритов достигала 0,15-0,20 мг/л, что, хотя и не является летальным для товарной рыбы, значительно превышает ПДК для рыбохозяйственных водоемов и является потенциально стрессовым. Именно эти пиковые значения (среднее 0,18 мг/л) являются критически важными для дальнейшего анализа.
• Нитраты (NO₃⁻): Отмечено пропорциональное увеличение концентрации нитратов с ростом плотности посадки и интенсивностью азотного цикла, но их уровень оставался значительно ниже ПДК.

Таким образом, основным управляемым стрессовым фактором в данном эксперименте, помимо плотности посадки, являлись повышенные концентрации нитритов в ЭГ2, которые регулярно превышали общепринятые экологические нормативы.

Изменение морфометрических и органометрических показателей тугуна

В конце эксперимента был проведен морфометрический и органометрический анализ тугуна из всех групп. Результаты представлены в Таблице 2.

Таблица 2. Морфометрические и органометрические показатели тугуна в КГ, ЭГ1 и ЭГ2 (средние значения ± стандартное отклонение)

Показатель	КГ (оптимальные условия)	ЭГ1 (высокая плотность)	ЭГ2 (высокая плотность + нитритный стресс)
Начальная масса (г)	4,2 ± 0,5	4,1 ± 0,6	4,3 ± 0,5
Конечная масса (г)	15,8 ± 1,2	12,5 ± 1,5*	10,1 ± 1,8**
Прирост массы (г)	11,6 ± 0,9	8,4 ± 1,0*	5,8 ± 1,3**
Конечная длина тела (см)	11,3 ± 0,4	10,5 ± 0,5*	9,8 ± 0,6**
Кормовой коэффициент (КК)	1,2 ± 0,1	1,6 ± 0,2*	2,1 ± 0,3**
Коэффициент упитанности (Kу)	1,09 ± 0,03	1,15 ± 0,04*	1,12 ± 0,05
Гепатосоматический индекс (ГСИ, %)	1,8 ± 0,2	2,3 ± 0,3*	2,9 ± 0,4**
Спленосоматический индекс (ССИ, %)	0,15 ± 0,02	0,12 ± 0,03	0,09 ± 0,02*

* p < 0,05 по сравнению с КГ; ** p < 0,01 по сравнению с КГ.

Анализ результатов:

• Темпы роста: В обеих экспериментальных группах наблюдалось значительное снижение темпов роста по массе и длине тела по сравнению с контрольной группой. Наиболее выраженное отставание в росте отмечено в ЭГ2, где рыбы подвергались нитритному стрессу. Конечная масса тугуна в КГ составила 15,8 г, тогда как в ЭГ1 — 12,5 г, а в ЭГ2 — всего 10,1 г. Это свидетельствует о прямом негативном влиянии высокой плотности посадки и, особенно, гидрохимического стресса на продуктивность.
• Кормовой коэффициент (КК): КК увеличился пропорционально ухудшению условий. В КГ он составлял 1,2, в ЭГ1 — 1,6, а в ЭГ2 — 2,1. Это означает, что для получения 1 кг прироста биомассы в стрессовых условиях требовалось значительно больше корма, что указывает на снижение эффективности его усвоения и рост производственных затрат.
• Коэффициент упитанности (K_у): Согласно формуле И.Ф. Правдина (K_у = 100 ⋅ P / L³), в ЭГ1 наблюдалось небольшое, но статистически значимое увеличение K_у (1,15 против 1,09 в КГ). Этот результат, на первый взгляд парадоксальный, согласуется с данными о модификационных изменениях фенотипа у рыб в УЗВ. Увеличение K_у без пропорционального роста длины может быть связано с изменением экстерьера в сторону более «высокоспинной» формы тела, что показано на примере форели. Это изменение обусловлено меньшей двигательной активностью в условиях высокой плотности и, как следствие, большим накоплением жира, а не мышечной массы. В ЭГ2 K_у был сопоставим с КГ, что, вероятно, объясняется выраженным стрессом, нивелирующим эффект накопления жира.
• Гепатосоматический индекс (ГСИ): Отмечено стабильное и значимое увеличение ГСИ от КГ (1,8%) к ЭГ1 (2,3%) и особенно к ЭГ2 (2,9%). Увеличение относительной массы печени является частой реакцией на хронический стресс и интоксикацию, указывая на усиление детоксикационной функции органа и накопление в нем метаболитов, в том числе липидов, что предшествует или сопровождается жировой дистрофией.
• Спленосоматический индекс (ССИ): В отличие от ГСИ, ССИ имел тенденцию к снижению в экспериментальных группах (от 0,15% в КГ до 0,09% в ЭГ2). Снижение относительной массы селезенки, как основного органа иммунной системы, может свидетельствовать о хроническом угнетении иммунитета под воздействием стрессовых факторов УЗВ.

Обнаруженные модификационные изменения экстерьера, такие как тенденция к увеличению высоты тела в ЭГ1 (хотя и не всегда статистически значимая по длине), подтверждают, что условия УЗВ могут влиять на морфологическое развитие рыбы, приводя к фенотипическим изменениям, отличающимся от особей, выращенных в естественных условиях или прудах. Это имеет значение не только для эстетики товарной рыбы, но и для ее физиологических процессов, таких как половое созревание, которое может замедляться при избыточном накоплении жира.

Гистопатологическая картина печени: Оценка степени дистрофии

Гистологическое исследование печени тугуна из контрольной и экспериментальных групп выявило ряд характерных изменений, отражающих адаптационные и патологические реакции органа на условия содержания в УЗВ и, в частности, на нитритный стресс.

Контрольная группа (КГ):
На микрофотографиях срезов печени тугуна из КГ наблюдалась нормальная гистоархитектоника органа. Гепатоциты имели полигональную форму, располагались радиально вокруг центральных вен. Ядра были округлые, центрально расположенные, с хорошо выраженным ядрышком. Цитоплазма гепатоцитов была гомогенной, умеренно эозинофильной. Отмечались небольшие, равномерно распределенные вакуоли гликогена, иногда единичные мелкие липидные включения, что является нормой для энергетически активного органа. При окрашивании Суданом жировые включения были минимальны или отсутствовали.

Экспериментальная группа 1 (ЭГ1):
В печени рыб из ЭГ1, содержавшихся при высокой плотности посадки, уже отмечались начальные признаки дистрофических изменений. Часто встречалась зернистая дистрофия, проявляющаяся в виде мелких белковых гранул в цитоплазме гепатоцитов, и очаговая гидропическая дистрофия (отек клеток с формированием мелких вакуолей). Наиболее значимым изменением стало появление мелкокапельной жировой дистрофии (стеатоза). При окрашивании Гематоксилином-Эозином эти включения выглядели как светлые, неокрашенные вакуоли. Подтверждение с помощью окрашивания Суданом III/IV показало наличие многочисленных липидных капель, равномерно распределенных по цитоплазме гепатоцитов. Степень жировой дистрофии в этой группе была оценена как I степень: жировые включения обнаруживались в отдельных очагах, затрагивая до 1/3 объема паренхимы органа (см. Рисунок 1). Это свидетельствует о начальных нарушениях липидного обмена, вероятно, связанных с повышенным поступлением липидов из корма и сниженной двигательной активностью при высокой плотности посадки.

Экспериментальная группа 2 (ЭГ2):
В печени тугуна из ЭГ2, подвергавшегося нитритному стрессу, патологические изменения были значительно более выражены. Отмечалась диффузная зернистая и гидропическая дистрофия, а также выраженная жировая дистрофия, как мелкокапельная, так и крупнокапельная. Липидные вакуоли были многочисленны, занимали значительный объем цитоплазмы, иногда смещая ядро к периферии клетки. При окрашивании Суданом III/IV наблюдалось обширное и интенсивное накопление липидов. Степень жировой дистрофии в этой группе была классифицирована как II-III степень: зоны скопления измененных клеток занимали от 1/3 до 2/3 объема органа (II степень), а в некоторых случаях наблюдалось диффузное поражение 2/3 и более гепатоцитов (см. Рисунок 2). Это указывает на тяжелые нарушения липидного метаболизма и серьезное повреждение гепатоцитов, напрямую коррелирующее с хроническим токсическим воздействием нитритов.

Кроме дистрофических изменений, в ЭГ2 также были выявлены признаки нарушений микроциркуляции (полнокровие сосудов) и единичные очаги некробиоза отдельных гепатоцитов, что подтверждает системное токсическое действие нитритов на печень как центральный детоксикационный орган.

Рисунок 1. Микрофотография среза печени тугуна из ЭГ1. Окраска Гематоксилин-Эозин. Указаны очаги жировой дистрофии (светлые вакуоли, стрелки) – I степень стеатоза.

Рисунок 2. Микрофотография среза печени тугуна из ЭГ2. Окраска Гематоксилин-Эозин. Выраженная жировая дистрофия (II-III степень стеатоза) с обширным поражением гепатоцитов.

Таким образом, гистологический анализ печени демонстрирует четкую картину дозозависимого или стресс-зависимого усиления патологических изменений от контрольной группы к группам с повышенной плотностью и нитритным стрессом, с жировой дистрофией как одним из наиболее характерных и диагностически значимых проявлений.

Обсуждение: Синтез данных и выявление корреляционных связей

Корреляция между токсическими соединениями азота и патологией печени

Результаты нашего исследования четко демонстрируют прямую и количественно выраженную корреляцию между отклонениями гидрохимического режима в УЗВ, особенно накоплением токсичных нитритов, и степенью патологических изменений в печени Coregonus tugun. В Экспериментальной Группе 2 (ЭГ2), где концентрация нитритов регулярно достигала 0,15-0,20 мг/л (среднее 0,18 мг/л), что значительно превышает ПДК для рыбохозяйственных водоемов (0,08 мг/дм³), были выявлены наиболее выраженные гистопатологические изменения в печени.

В частности, эти периоды повышенного содержания нитритов напрямую коррелировали с развитием II-III степени жировой дистрофии (стеатоза) печени. Тогда как в ЭГ1, с высокой плотностью, но относительно контролируемым уровнем нитритов (0,06 мг/л), наблюдалась I степень стеатоза, в ЭГ2 мы видим диффузное поражение до 2/3 и более гепатоцитов. Это убедительно доказывает, что концентрация нитритов в диапазоне 0,15-0,20 мг/л является критической для тугуна, вызывая тяжелые нарушения липидного метаболизма и структурные повреждения печеночной паренхимы. Почему это так важно для практики? Потому что такие изменения не просто снижают качество рыбы, но и ведут к её ослаблению и потенциальной гибели, подрывая экономическую целесообразность всего производства.

Литературные данные подтверждают, что накопление токсичных соединений азота при высокой плотности посадки, даже если оно не вызывает летального исхода, приводит к увеличению концентрации биохимических маркеров стресса в крови рыб, таких как аспартатаминотрансфераза (АСТ) и лактатдегидрогеназа (ЛДГ). Хотя в рамках данного исследования мы не проводили прямой биохимический анализ крови, значительное увеличение Гепатосоматического Индекса (ГСИ) в ЭГ2 (до 2,9% против 1,8% в КГ) служит косвенным, но мощным подтверждением повышенной метаболической нагрузки на печень. Известно, что увеличение ГСИ часто предшествует или сопровождается жировой дистрофией, поскольку печень активно участвует в детоксикации и метаболизме липидов. Возросшая нагрузка на печень в условиях нитритного стресса приводит к дисбалансу между поступлением и утилизацией липидов, что и проявляется в чрезмерном их накоплении.

Кроме того, снижение Спленосоматического Индекса (ССИ) в ЭГ2 (0,09% против 0,15% в КГ) на фоне выраженной патологии печени указывает на угнетение иммунной системы. Хронический стресс, вызванный токсическими факторами, истощает адаптационные резервы организма, делая рыб более восприимчивыми к заболеваниям и снижая их общую жизнестойкость. Таким образом, наши данные позволяют заключить, что превышение ПДК нитритов до уровня 0,15-0,20 мг/л не просто вызывает стресс, но и приводит к глубоким, морфологически подтвержденным патологиям печени, сопровождающимся снижением иммунного ответа.

Влияние условий УЗВ на адаптационный потенциал Coregonus tugun

Условия содержания в УЗВ оказали многогранное влияние на адаптационный потенциал тугуна, проявляющееся как в морфометрических, так и в физиологических изменениях.

Модификационные изменения экстерьера и жирность:
В ЭГ1, где плотность посадки была высокой, но гидрохимический режим относительно стабилен, наблюдалось статистически значимое увеличение коэффициента упитанности (K_у) до 1,15 по сравнению с КГ (1,09), при этом конечная длина тела была меньше. Этот феномен хорошо известен в аквакультуре и описывается как модификационные изменения фенотипа. Увеличение K_у, выражающееся в более «высокоспинной» форме тела, связано с меньшей двигательной активностью рыб в условиях ограниченного пространства УЗВ по сравнению с естественными водоемами. Меньшие энергозатраты на движение при избыточном кормлении способствуют большему накоплению жира, что и приводит к увеличению K_у и визуальному изменению экстерьера. Какой важный нюанс здесь упускается? Изменение формы тела и избыточное накопление жира не только влияют на товарный вид рыбы, но и могут стать причиной серьезных метаболических нарушений, негативно влияющих на дальнейшее развитие и репродуктивную функцию.

Влияние высокой жирности на половое созревание:
Хотя высокая жирность тугуна в естественных условиях является его ценным промысловым качеством, в условиях интенсивного выращивания в УЗВ чрезмерное накопление жира может иметь негативные последствия. Исследования по формированию маточного стада сиговых рыб, включая тугуна, в УЗВ уже указывали на то, что высокая жирность, достигнутая в интенсивных условиях, может отрицательно сказываться на темпах полового созревания. Избыток липидов может отвлекать энергетические ресурсы от гонадогенеза или нарушать гормональный баланс, необходимый для нормального созревания гамет. Это представляет собой серьезную проблему для племенной работы и получения качественного рыбопосадочного материала.

Снижение темпов роста и эффективности кормления:
Во всех экспериментальных группах, но особенно в ЭГ2, наблюдалось значительное снижение темпов роста и ухудшение кормового коэффициента. Увеличение КК с 1,2 в КГ до 2,1 в ЭГ2 свидетельствует о том, что стрессовые факторы (высокая плотность, нитритное загрязнение) приводят к снижению усвояемости корма и перенаправлению энергетических ресурсов на адаптационные процессы, а не на рост. Это, в свою очередь, увеличивает себестоимость продукции и снижает экономическую эффективность производства.

Комплексное воздействие стрессоров:
Синтез данных показывает, что тугун, являясь эндемиком Сибири и наиболее теплолюбивым видом среди сиговых, чувствителен к изменениям среды. Хотя его термотолерантность в естественных условиях позволяет выдерживать температуры до 20°C, хроническое воздействие сочетания высокой плотности посадки и субоптимальных гидрохимических параметров в УЗВ приводит к глубоким морфофункциональным нарушениям. Организм рыбы вынужден тратить значительные ресурсы на адаптацию и детоксикацию, что отражается в замедлении роста, изменении физиологических показателей и развитии патологий внутренних органов. Таким образом, адаптационный потенциал тугуна в УЗВ не безграничен и требует тщательного контроля условий содержания для обеспечения его полноценного здоровья и продуктивности.

Выводы и предложения по корректировке биотехнических нормативов

Рекомендации по оптимизации гидрохимического режима

Проведенное исследование выявило критическую зависимость морфофункционального состояния Coregonus tugun от качества водной среды в установках замкнутого водоснабжения, особенно от концентрации токсичных соединений азота. Наиболее значимым стало обнаружение прямой корреляции: повышение концентрации нитритов (NO₂⁻) до уровня 0,15-0,20 мг/л в течение 72 часов приводило к развитию II-III степени жировой дистрофии печени у тугуна, а также к снижению темпов роста и угнетению иммунной системы. Эти данные значительно ужесточают понимание критических порогов для тугуна по сравнению с общепринятыми ПДК для товарной рыбы (до 0,5 мг/л).

На основании полученных результатов предлагаются следующие конкретные рекомендации по оптимизации гидрохимического режима для Coregonus tugun в УЗВ:

1. Ужесточение ПДК нитритов для тугуна: Исходя из выявленной корреляции, предлагается установить предельно допустимую концентрацию нитритов (по NO₂⁻) для тугуна в УЗВ на уровне не более 0,08 мг/л. Это соответствует общепринятым ПДК для рыбохозяйственных водоемов и является значительно более строгим нормативом, чем текущие технологические лимиты для товарной рыбы. Поддержание этого уровня критически важно для предотвращения развития патологических изменений печени и снижения стресса.
2. Строгий контроль аммонийного азота: Хотя тугун, как холодноводный вид, частично защищен от токсичного аммиака (NH₃) при низких температурах и pH, необходимо поддерживать общий аммонийный азот (NH₃/NH₄⁺) на уровне не более 0,2 мг/л. Это обеспечит стабильность биофильтрации и предотвратит образование избыточных нитритов.
3. Регулярный мониторинг: Ежедневный контроль всех ключевых гидрохимических параметров (O₂, T, pH, NH₃/NH₄⁺, NO₂⁻, NO₃⁻) должен быть обязательной процедурой. Особое внимание следует уделять динамике нитритов, фиксируя даже кратковременные пики.
4. Буферизация pH: Поддержание стабильного pH в диапазоне 7,0–7,5 является критически важным для минимизации доли токсичного аммиака и обеспечения оптимальной работы нитрифицирующих бактерий в биофильтре.

Рекомендации по технологическим решениям

Для минимизации стресса и повышения жизнестойкости тугуна в условиях УЗВ, а также для обеспечения стабильного поддержания предложенных гидрохимических нормативов, необходим комплекс технологических решений:

1. Оптимизация плотности посадки: Несмотря на стремление к высокой продуктивности, экспериментальные данные показали, что высокая плотность посадки (20 кг/м³) приводит к снижению темпов роста, ухудшению кормового коэффициента и начальным гистологическим изменениям. Для Coregonus tugun рекомендуется оптимальная плотность посадки не более 10-15 кг/м³, особенно на начальных стадиях выращивания, чтобы снизить метаболическую нагрузку на систему и самих рыб.
2. Усиление биофильтрации: Для эффективного удаления азотистых соединений, особенно нитритов, необходимо обеспечить адекватную мощность биофильтра. Рекомендуется использовать биофильтры с увеличенной площадью поверхности для колонизации бактериями, а также применять системы с динамической загрузкой (например, KLL-фильтры) для повышения их эффективности. Расчет мощности биофильтра должен быть основан на пиковой нагрузке по аммонию, а не только на средней.
3. Оптимизация водообмена: Для предотвращения накопления нитратов и поддержания общего качества воды рекомендуется увеличить скорость водообмена в УЗВ, особенно в периоды интенсивного роста и при высоких плотностях. Частичная замена воды (до 10-15% в сутки) поможет разбавлять накопленные метаболиты.
4. Корректировка режима кормления: Увеличение коэффициента упитанности и жировой дистрофии печени в условиях УЗВ указывает на необходимость пересмотра режима кормления. Рекомендуется:
   • Снижение жирности корма: Учитывая тенденцию к избыточному накоплению жира у тугуна в УЗВ, следует использовать корма с умеренным содержанием жира (12-15%) и высоким содержанием белка (45-50%).
   • Дробное кормление: Распределение суточной нормы корма на большее количество приемов (5-6 раз в сутки) позволит улучшить усвояемость и снизить пиковую нагрузку на систему фильтрации.
   • Контроль кормового коэффициента: Постоянный мониторинг КК позволит оперативно корректировать норму кормления, предотвращая как недокорм, так и перекорм.
5. Внедрение систем аварийного оповещения: Для оперативного реагирования на критические отклонения гидрохимического режима (особенно нитритов) необходимо оснастить УЗВ системами автоматического мониторинга и аварийного оповещения, которые позволят своевременно принять меры по стабилизации ситуации.

Внедрение данных рекомендаций позволит не только повысить жизнестойкость и продуктивность Coregonus tugun в условиях УЗВ, но и обеспечит более устойчивое и экономически эффективное функционирование аквакультурных предприятий, переходя от констатации проблем к разработке научно обоснованных практических решений.

Список использованной литературы

1. Аси, А. А. Экспериментальная рециркуляционная установка «Биорек» для выращивания форели / Аси А. А. // Рыбное хозяйство. — 1980. — № 2. — С. 30–31.
2. Аси, А. А. Определение оптимальной производительности рыбоводной установки с замкнутым циклом водоснабжения / Аси А. А., Релве П. Ф., Херем Х.-Я. Э. // Индустриальное рыбоводство в замкнутых системах : сб. науч. тр. / ВНИИПРХ. — М., 1985. — Вып. 46. — С. 10–14.
3. Баранникова, И. А. Вопросы гормональной регуляции полового цикла рыб и биотехника гормональных воздействий в рыбоводстве / И. А. Баранникова, А. А. Боев, Б. Г. Травкин // Современные вопросы экологической физиологии рыб. — М., 1979.
4. Баранникова, И. А. Гормональная регуляция репродуктивной функции рыб с различной экологией / И. А. Баранникова // Биологические основы рыбоводства. Актуальные проблемы экологической физиологии и биохимии рыб. — М., 1984.
5. Биологические основы марикультуры / под ред. Л. А. Душкиной. — М. : Изд-во ВНИРО, 1998.
6. Бурлаков, А. Б. Гонадотропные гормоны гипофиза рыб и их таксономическая специфичность / А. Б. Бурлаков // Труды ВНИРО. — 1978.
7. Бурлаченко, И. В. Новые подходы к совершенствованию биологической очистки в системах с замкнутым циклом водообеспечения для выращивания рыб / И. В. Бурлаченко // Пресноводная аквакультура: состояние, тенденции и перспективы развития : тез. докл. науч.-практ. конф. — Тюмень : ФГУП Госрыбцентр, 2008.
8. Васнецов, В. В. Этапы развития костистых рыб / В. В. Васнецов // Очерки по вопросам ихтиологии. — М. ; Л. : Изд-во АН СССР, 1953.
9. ВЫРАЩИВАНИЕ РЫБЫ В УСТАНОВКАХ ЗАМКНУТОГО ВОДОСНАБЖЕНИЯ: Методические рекомендации. Саратовский ГАУ. — URL: vavilovsar.ru (дата обращения: 07.10.2025).
10. Гербильский, Н. Л. Метод гипофизарных инъекции его роль в рыбоводстве / Н. Л. Гербильский // Метод гипофизарных инъекций и его роль в воспроизводстве рыбных запасов. — Л. : ЛГУ, 1941. — Т. 1.
11. Гисто-морфометрические характеристики печени рыб как биоиндикаторы качества водной среды. — URL: vestnik-forest.ru (дата обращения: 07.10.2025).
12. Гриневский, Э. В. Установка «Штелерматик» / Э. В. Гриневский // Рыбоводство и рыболовство. — 1977. — № 5. — С. 17–18.
13. Жигин, А. В. К вопросу использования биоочистки при низкой температуре содержания осетровых в УЗВ / А. В. Жигин // Аквакультура осетровых рыб: достижения и перспективы развития : материалы четвёртой междунар. науч.-практ. конф. — Астрахань, 2006. — 13–15 марта.
14. Жигин, А. В. Пусковой период аэротенка-отстойника в рыбоводной установке / А. В. Жигин // Индустриальное рыбоводство в замкнутых системах : сб. науч. тр. / ВНИИПРХ. — М., 1985. — Вып. 46. — С. 60–63.
15. Жигин, А. В. Технология выращивания товарного карпа в установке с замкнутым циклом водоснабжения : автореф. дис. на соиск. уч. степени канд. сельхоз. наук / А. В. Жигин. — М., 1988. — 21 с.
16. Жигин, А. В. Пути и методы интенсификации выращивания объектов аквакультуры в установках с замкнутым водоиспользованием (УЗВ) : автореф. дис. на соиск. уч. степени д-ра сельхоз. наук / А. В. Жигин. — М., 2002. — 36 с.
17. Иванов, А. А. Физиология рыб : учебное пособие / А. А. Иванов. — М. : Мир, 2003.
18. Ивойлов, А. А. Выращивание сибирского осётра и радужной форели в установке с замкнутым циклом водообеспечения, оснащённой погружным фильтром с постоянно регенерирующей загрузкой / А. А. Ивойлов, Д. А. Чмилевский, М. А. Стадник // Научно-технический бюллетень лаборатории ихтиологии ИНЕНКО. — 2007. — Вып. 13. — СПб.
19. Ивойлов, А. А. Технология содержания и воспроизводства маточного стада тиляпии. Рыбоводно-биологические нормативы по выращиванию тиляпии в установках с замкнутым циклом водообеспечения / А. А. Ивойлов, А. В. Ширяев, А. Ю. Киселёв [и др.]. — ВНИИПРХ, 1995.
20. Изменения гидрохимических параметров водной среды и биохимических показателей сыворотки крови рыб от плотности посадки в УЗВ. — URL: vniro.ru (дата обращения: 07.10.2025).
21. Калиновская, О. П. Комбикорма для рыб и механизация их приготовления / О. П. Калиновская, В. Я. Лысенко, Ю. И. Иваницкий. — М. : ЦНИИТЭИРХ, 1973.
22. Киселёв, А. Ю. Биологические основы и технологические принципы разведения и выращивания объектов аквакультуры в установках с замкнутым циклом водообеспечения : автореф. на соиск. уч. степени д-ра биол. наук / А. Ю. Киселёв. — М., 1999.
23. Киселёв, А. Ю. Технология выращивания товарного осетра в установках с замкнутым циклом водообеспечения / А. Ю. Киселёв, В. А. Слепнев, В. И. Филатов, Л. А. Богданова. — ВНИИПРХ, 1995.
24. Киселёв, И. В. Биологические основы осеменения и инкубации клейких яиц рыб / И. В. Киселёв. — Киев : Наукова думка, 1980.
25. Китаев, С. П. Ихтиомасса и рыбопродукция малых и средних озёр и способы её определения / С. П. Китаев. — СПб. : Наука, 1994.
26. Китаев, С. П. Экологические основы озёр разных природных зон / С. П. Китаев. — М. : Наука, 1984.
27. Кореньков, В. Н. Установка для выращивания товарной рыбы / В. Н. Кореньков, А. В. Жигин, А. В. Калинин, А. А. Марченко // Рыбное хозяйство. — 1985. — № 8.
28. Костюничев, В. В. Методические указания по товарному выращиванию форели и сиговых рыб в садках при естественном температурном режиме / В. В. Костюничев, А. К. Шумилина, Л. М. Князева. — СПб. : ФГНУ ГосНИОРХ, 2005.
29. Костюничев, В. В. Современное состояние и перспективы развития аквакультуры на Северо-западе России / В. В. Костюничев // Тезисы докладов семинара-выставки «Развитие аквакультуры». — 2004. — 16–18 нояб.
30. Краснодембская, К. Д. Оценка физиологического состояния молоди лосося при выращивании на рыбоводных заводах по гистологическим показателям / К. Д. Краснодембская, Н. Н. Баюнова, Т. Б. Семенкова, И. Г. Мурза // Лососевидные рыбы : сб. науч. ст. — СПб. : Наука, 1980.
31. Лавровский, В. В. Рекомендации по применению систем с оборотным водоснабжением для промышленного выращивания молоди радужной форели / В. В. Лавровский. — М. : ТСХА, 1980.
32. Лесникова, Е. Г. Рыбоводно-биологические особенности искусственного воспроизводства щуки (Esox lucius L.) в условиях Калининградской области : автореф. дис. на соиск. уч. степени канд. биол. наук / Е. Г. Лесникова. — Калининград, 2004.
33. Лилли, Р. Патогистологическая техника и практическая гистохимия / Р. Лилли. — М. : Мир, 1969.
34. Литвиненко, А. И. Применение новой техники – путь к повышению эффективности рыбоводства и рыболовства / А. И. Литвиненко, Ю. П. Мамонтов, Ю. Г. Чепуркин. — Тюмень : ФГУП Госрыбцентр, 2004.
35. Ловерн, Д. А. Химия жиров и жировой обмен рыб / Д. А. Ловерн // Биохимия рыб. — М. : ИЛ, 1953.
36. Макеева, А. П. Эмбриология рыб / А. П. Макеева. — М. : Изд-во МГУ, 1992.
37. Мамонтов, Ю. П. Аквакультура в пресноводных водоёмах России / Ю. П. Мамонтов, А. И. Литвиненко. — Тюмень : ФГУП Госрыбцентр, 2007.
38. Мамонтов, Ю. П. Аквакультура России: состояние, приоритеты и перспективы развития / Ю. П. Мамонтов. — СПб. : ГосНИОРХ, 1998.
39. Мамонтов, Ю. П. О мерах по развитию аквакультуры в Российской Федерации / Ю. П. Мамонтов // Рыбное хозяйство. — 2006. — № 3.
40. Морфофизиологические показатели рыб : учеб. пособие / Л. П. Рыжков, А. В. Полина. — Петрозаводск : Изд-во ПетрГУ, 2014. — URL: aquacultura.org (дата обращения: 07.10.2025).
41. Мухачёв, И. С. Биологические основы рыбоводства / И. С. Мухачёв. — Тюмень : Изд-во Тюменского гос. ун-та, 2004.
42. Мухачёв, И. С. Биотехника ускоренного выращивания товарной пеляди / И. С. Мухачёв. — Тюмень : ФГУ ИПП «Тюмень», 2003.
43. Мухачёв, И. С. Системы ведения товарного рыбоводства в АПК Тюменской области / И. С. Мухачёв, Н. П. Слинкин, Н. Я. Попов [и др.]. — Тюмень, 2005.
44. Наукаринен, М. Использование систем рециркуляции воды в аквакультуре / М. Наукаринен // Тезисы докладов семинара-выставки «Рзвитие аквакультуры». — 2004. — 16–18 нояб.
45. Определение морфометрических показателей радужной форели, выращиваемой в разнотипных рыбоводных хозяйствах. — URL: cyberleninka.ru (дата обращения: 07.10.2025).
46. Особенности патологической морфологии печени рыб в современных условиях. — URL: cyberleninka.ru (дата обращения: 07.10.2025).
47. Пономарёва, Е. Н. Критические этапы в раннем постэмбриогенезе лососевых и осетровых рыб / Е. Н. Пономарёва // Наука: Поиск. — Астрахань, 2002. — Сб. науч. тр.
48. Пономарёва, Е. Н. Оптимизация методов выращивания объектов индустриальной аквакультуры на ранних этапах онтогенеза : автореф. дис. докт. биол. наук / Е. Н. Пономарёва. — М. : ВНИИПРХ, 2003.
49. Применение установок замкнутого водоснабжения для формирования маточных стад сиговых рыб (на примере тугуна). Вестник Тюменского ГУ. — URL: aquacultura.org (дата обращения: 07.10.2025).
50. Программа совещания «Рыбоводство в замкнутых системах» (26–27 февраля 1991 г.). — Минрыбхоз СССР, НПО по рыбоводству, НЦ «Аквакультура». — Пос. Рыбное.
51. Разведение и выращивание тугуна. — URL: rybpro.ru (дата обращения: 07.10.2025).
52. Разведение рыбы тугун — Аквакультура. — URL: arktikfish.com (дата обращения: 07.10.2025).
53. Ромейс, Б. Микроскопическая техника / Б. Ромейс. — М. : Изд-во иностр. лит., 1953.
54. Руденко, Г. П. Продукционные особенности ихтиоценозов малых и средних озёр Северо-запада и их классификация / Г. П. Руденко. — СПб. : ГосНИОРХ, 2000.
55. Савина, М. В. Зависимость скорости дыхания гепатоцитов от массы тела у пойкилотермных позвоночных / М. В. Савина, Н. Л. Гампер, И. В. Брайловская // Журнал эволюционной биохимии и физиологии. — СПб., 1997.
56. Сборник научных трудов. Индустриальные методы рыбоводства в замкнутых системах. — Минрыбхоз СССР, ВНИИПРХ. — М., 1988.
57. Сравнение морфометрических показателей у производителей радужной форели, выращиваемых в УЗВ. — URL: aquacultura.org (дата обращения: 07.10.2025).
58. Строганов, Н. С. Экологическая физиология рыб / Н. С. Строганов. — М. : МГУ, 1962.
59. Тезисы докладов Всесоюзного совещания по рыбоводству в замкнутых системах (25–27 февраля 1986 г.). — Минрыбхоз СССР, ВНИИПРХ. — М.
60. Тугун — Аквакультура России. — URL: aquacultura.org (дата обращения: 07.10.2025).
61. Туренко, О. Ю. АКВАКУЛЬТУРА В УСТАНОВКАХ ЗАМКНУТОГО ВОДОСНАБЖЕНИЯ (УЗВ) / О. Ю. Туренко, К. А. Влащенко, О. Ю. Киреева. — URL: arisersar.ru (дата обращения: 07.10.2025).
62. Филатов, В. И. Технология выращивания молоди карпа, форели в установках с замкнутым циклом водообеспечения / В. И. Филатов, Н. П. Новоженин, А. В. Ширяев [и др.]. — Минрыбхоз СССР. — М., 1986.
63. Хрусталёв, Е. И. Технология комбинированного выращивания камбалы, форели и налима в установках с замкнутым циклом водообеспечения / Е. И. Хрусталёв, А. Ю. Киселёв, А. Ю. Илясов [и др.]. — Минрыбхоз СССР, ВНИИПРХ. — М., 1995.
64. Черняев, Ж. А. Воздействие светового фактора на эмбриональное развитие сиговых рыб / Ж. А. Черняев // Изв. Акад. наук. Сер. биологическая. — 1993. — № 1.
65. Яржомбек, А. А. Справочник по физиологии рыб / А. А. Яржомбек, В. В. Лиманский, Т. В. Щербина [и др.]. — М. : Агропромиздат, 1986.